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ages糖基化修饰牛血清蛋白,AGES-Modified Bovine Serum Albumin,合成步骤概述

时间:2026-02-11 14:54:04       浏览:88
ages糖基化修饰牛血清蛋白,AGES-Modified Bovine Serum Albumin,合成步骤概述

英文名称:AGES-Modified Bovine Serum Albumin
中文名称:AGES糖基化修饰牛血清蛋白

AGES(Advanced Glycation End Products,晚期糖基化终产物)糖基化修饰牛血清蛋白(BSA, Bovine Serum Albumin)是一种通过非酶促糖基化方式,将糖类衍生物引入蛋白质分子上的化学修饰策略。该方法广泛应用于研究糖基化对蛋白质功能、结构变化及免疫学特性影响,也常作为AGEs相关疾病模型(如糖尿病并发症、老化研究)中的实验材料。通过这种修饰,BSA分子表面暴露多个糖基化位点,赋予蛋白质新的化学性质和生物功能。

合成步骤概述

  1. 原料准备

    • 选用高纯度牛血清蛋白(BSA),通常溶解于缓冲液(如磷酸盐缓冲液PBS)中,浓度控制在10–50 mg/mL,以保证反应充分且蛋白质稳定。

    • 糖化试剂通常选用还原性糖或糖衍生物,如葡萄糖、果糖或甘露糖。糖浓度可根据实验设计调节,一般为蛋白质摩尔比的10–50倍,以促进充分反应。

  2. 糖化反应条件

    • 将BSA溶液与糖类混合后,通常在37–60°C条件下温和孵育数小时至数天,以模拟非酶促Maillard反应(蛋白质氨基与还原性糖醛基发生加成反应)。

    • 反应体系pH一般维持中性至弱碱性(pH 7–8),有助于保护蛋白质构象,避免蛋白质变性或聚集。

    • 可在避光条件下进行,以减少糖氧化产物对蛋白质的不利影响。

  3. AGEs形成机理

    • 初期反应:糖分子与BSA赖氨酸或精氨酸侧链氨基形成席夫碱(Schiff base)。

    • 中间产物:席夫碱通过亚稳解形成Amadori产物,逐步稳定。

    • 终产物:进一步氧化或重排,形成晚期糖基化终产物(AGEs),其结构可引入荧光性质或交联结构。

  4. 纯化步骤

    • 反应结束后,通过透析或凝胶过滤去除未反应糖分子和小分子副产物,保证糖化BSA的纯度。

    • 可结合超滤或离心浓缩,使产物浓度适合后续分析或实验使用。

  5. 表征方法

    • 蛋白质浓度可通过BCA法或紫外吸光法测定。

    • AGEs形成可通过荧光光谱(Ex 370 nm / Em 440 nm)监测,也可用SDS-PAGE观察分子量变化或糖基化交联情况。

    • 若需要,可结合质谱或HPLC分析糖化位点及修饰程度,实现定量表征。

瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询

纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:瑞禧生物

产品目录

DSPE-SS-PEG2K-5FU
DSPE-双硫键-聚乙二醇-氟尿嘧啶偶联物
DSPE-SS-PEG2K-Gem
DSPE-双硫键-聚乙二醇-吉西他滨偶联物
DSPE-SS-PEG-DOX-PTX
DSPE-双硫键-聚乙二醇-多柔比星-紫杉醇偶联物
DSPE-SS-PEG-MTX-PTX
DSPE-双硫键-聚乙二醇-甲氨蝶呤-紫杉醇偶联物
DSPE-SS-PEG-CPT-DOX
DSPE-双硫键-聚乙二醇-喜树碱-多柔比星偶联物

仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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