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AF 488 氨基,Alexa Fluor488 NH2的光学特性

时间:2026-02-24 17:21:54       浏览:10
产品名称:AF 488 氨基,Alexa Fluor488 NH2的光学特性
一、反应选择性
与羧基(-COOH)的高效偶联
AF 488 氨基通过其末端的伯氨基(-NH₂)与羧基发生酰胺化反应,生成稳定的酰胺键(-CONH-)。这一反应在EDC/NHS(碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺)活化体系下效率极高,室温下1小时内即可完成,且产物稳定性良好。例如,在蛋白质标记中,AF 488 氨基可精准修饰抗体或酶的羧基端,实现荧光信号的引入。
对醛基(-CHO)的特异性反应
通过席夫碱反应(Schiff base reaction),AF 488 氨基可与醛基结合,生成亚胺键(-C=N-)。该反应需在弱碱性条件(如pH 7.4)下进行,并通过后续硼氢化钠还原步骤稳定键合,避免水解。此特性使其适用于糖蛋白或固定化细胞的荧光标记。
避免与非目标基团的反应
AF 488 氨基的氨基在生理条件下(pH 4.5-9.0)对氨基、羟基等常见基团无显著反应活性,确保了标记的特异性。例如,在复杂生物样本中,它不会与细胞内的氨基或羟基发生非特异性结合,从而降低背景噪声。
二、光学特性
高亮度绿色荧光
AF 488 氨基的激发波长为495 nm,发射波长为519 nm,与绿色荧光蛋白(GFP)的荧光特性高度匹配,适用于荧光显微镜、流式细胞术等成像技术。其荧光量子产率高达0.92,光稳定性是荧光素的5倍以上,可支持长时间动态观测。
宽pH范围稳定性
在pH 4.5-9.0的范围内,AF 488 氨基的荧光强度基本保持不变,使其在酸性或碱性生物环境中(如细胞内吞体或溶酶体)仍能稳定发光。
三、化学性质
强亲水性
AF 488 氨基分子中含磺酸基团,赋予其良好的水溶性(>1 mM in water),避免聚集导致的荧光淬灭。这一特性使其在标记水溶性生物分子(如蛋白质、核酸)时表现突出。
低细胞毒性
在活细胞成像中,AF 488 氨基的毒性较低,但需注意其有机溶剂(如DMSO)在高浓度下可能损伤细胞。建议使用水溶性缓冲液(如PBS)溶解,并控制有机溶剂浓度<10%。


关于我们:
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