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FAM maleimide, 6-isomer(6-异构体荧光素马来酰亚胺)是一种兼具荧光特性与特异性反应活性的功能化荧光试剂,常用英文别名包括6-FAM maleimide、Fluorescein-6-maleimide,属于荧光素类衍生物,核心结构由6-异构体荧光素(FAM)发色团与马来酰亚胺(maleimide)活性基团构成,是荧光标记、分子偶联领域的常用工具试剂,凭借其优异的荧光性能和特异性反应活性,广泛应用于材料修饰、荧光探针合成等领域。
理化性质方面,FAM maleimide, 6-isomer为黄色至橙黄色结晶性粉末,分子式为C24H15NO7,分子量为433.38,纯度通常≥95%(HPLC检测)。该化合物具有典型的荧光素类染料特性,在水溶液中呈现明亮的绿色荧光,光学性能稳定,激发波长(Ex)约为494 nm,发射波长(Em)约为518 nm,荧光量子产率高,光稳定性良好,不易发生光漂白,可满足长时间荧光检测需求。溶解性方面,易溶于DMF、DMSO等极性有机溶剂,在水中溶解度较低,可通过加入少量有机溶剂或调节缓冲液pH(推荐pH 6.5-7.5)改善水溶性,避免在强酸或强碱条件下使用,防止荧光淬灭或马来酰亚胺基团失活。储存条件为-20℃避光、干燥保存,避免光照和高温,防止荧光性能下降。
反应特性上,FAM maleimide, 6-isomer的核心优势的是特异性反应活性与荧光性能的协同作用:马来酰亚胺基团可在温和条件下(pH 6.5-7.5),与含巯基(-SH,如半胱氨酸残基、谷胱甘肽)的分子发生特异性加成反应,形成稳定的硫醚键,反应高效且无副产物,不与氨基、羟基等其他官能团发生非特异性反应,可实现对目标分子的精准标记。而6-异构体荧光素发色团赋予试剂明亮的绿色荧光,标记后不影响目标分子的空间结构和生物活性,且荧光信号强度高、背景干扰小,可通过荧光显微镜、流式细胞仪等设备实现快速检测与追踪。此外,该试剂的反应速率受温度影响较小,在室温下即可完成偶联反应,无需复杂的反应条件控制。
应用领域主要集中在荧光标记、材料荧光功能化及探针分子合成。在荧光标记中,可用于含巯基蛋白质、多肽、核酸等生物分子的特异性标记,实现生物分子的荧光示踪与检测,为分子相互作用研究提供工具;在材料功能化中,可通过马来酰亚胺与材料表面的巯基反应,将荧光素基团接枝到聚合物、纳米颗粒、微球等材料表面,赋予材料荧光识别功能,用于材料的分布追踪、靶向识别等研究;在探针分子合成中,可作为荧光模块与其他功能单元(如识别基团、靶向分子)偶联,合成荧光探针,用于环境监测、物质检测等领域,凭借其高荧光强度和特异性,提升检测灵敏度和准确性。此外,该试剂可用于体外实验中的荧光标记,不涉及体内应用,严格避开医学临床方向。

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