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MB 680R 叠氮化物,中文名称为MB 680R 叠氮基团,常用英文别名为MB 680R Azide、MB 680R N3,是基于MB 680R近红外荧光染料的叠氮衍生物,融合了MB 680R染料的近红外荧光特性(发射波长约680nm)与叠氮基团的化学活性,主要用于近红外荧光成像、生物分子标记、活体成像研究等领域,不涉及临床治疗用途。该化合物具有高光稳定性、低细胞毒性和强组织穿透性,分子结构中含有的磺基的提升了水溶性,可有效减少背景荧光干扰,是活体生物分析和深层组织成像的理想试剂。
其制备以MB 680R荧光染料为核心原料,分两步完成修饰与纯化。第一步是MB 680R荧光染料的合成,以芳香族二胺化合物为起始原料,与芳香族醛类化合物发生缩合反应,形成荧光发色核心,经氧化闭环反应构建MB 680R的基本骨架,再通过磺化反应引入磺基,提升水溶性和荧光稳定性,反应完成后经重结晶、硅胶柱层析纯化,得到高纯度的MB 680R荧光染料。第二步是氨基化修饰与叠氮基团引入,将MB 680R荧光染料溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中,加入过量的1,3-丙二胺,在70℃恒温搅拌反应9-11小时,使MB 680R分子中的活性基团与丙二胺发生亲核取代反应,在分子末端引入氨基,反应完成后旋转蒸发去除过量丙二胺,经柱层析纯化得到氨基修饰的MB 680R中间体。
随后,将中间体溶于无水DMSO中,加入适量的叠氮磷酸二苯酯(DPPA)和三乙胺,三乙胺作为缚酸剂,室温避光搅拌反应4-5小时,促进氨基与DPPA发生取代反应,生成叠氮基团取代的产物。反应结束后,向反应液中加入去离子水,用二氯甲烷萃取三次,合并有机相,加入无水硫酸镁干燥,过滤后旋转蒸发去除溶剂,得到粗产物。粗产物经高效液相色谱(HPLC)纯化,收集目标荧光组分,真空干燥后获得高纯度的MB 680R 叠氮化物。该化合物储存于-20℃干燥避光环境,避免光照导致荧光淬灭,其叠氮基团可与炔基、DBCO基团发生高选择性点击反应,广泛用于活体动物成像、蛋白质标记及生物分子示踪。

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