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Sulfo-DBCO-CY3,磺酸基DBCO-CY3,Sulfo-Dibenzocyclooctyne-Cyanine3

时间:2026-05-09 15:20:01       浏览:32

Sulfo-DBCO-CY3, Sulfo-Dibenzocyclooctyne-Cyanine3, Copper-Free Click Fluorophore, Water-Soluble DBCO-Cy3

在点击化学的星空中,Sulfo-DBCO-CY3是一颗兼具反应活性与光学亮度的双子星。其分子由三个功能模块精密拼接:DBCO(二苯并环辛炔)承担无铜点击反应的重任,Cy3提供明亮的橙红色荧光(激发550 nm/发射570 nm),磺酸基确保全水相操作的可行性。这一设计使其成为活细胞原位标记的明星试剂——无需有毒铜催化剂,仅凭环辛炔与叠氮的应变促进环加成(SPAAC),即可在生理条件下实现高效、特异、无损的荧光标记。

DBCO与叠氮的SPAAC反应速率常数约1-2 M⁻¹s⁻¹,虽低于CuAAC的10³量级,但在微摩尔浓度的生物标记场景中已足够高效。更关键的是,这一反应完全不需要金属催化剂,彻底规避了Cu(I)诱导的活性氧(ROS)生成与蛋白质氧化损伤。对于原代神经元、干细胞与类器官等对氧化应激敏感的样品,Sulfo-DBCO-CY3的无铜特性是不可替代的优势。

在超分辨显微镜领域,Sulfo-DBCO-CY3是STORM(随机光学重建显微镜)与PAINT(点积累成像)技术的理想染料。STORM依赖于荧光分子的可控光开关——Cy3在巯基乙胺(MEA)存在的还原性缓冲液中,可在亮态与暗态之间反复切换,每次亮态发射约2000个光子后进入暗态,数秒后自发恢复。单个Sulfo-DBCO-CY3分子可经历数百次开关循环,累积定位精度达15 nm。用其标记的核孔复合体蛋白,STORM图像清晰呈现八重对称的环状结构,分辨率是衍射极限的十倍以上。

DNA-PAINT是Sulfo-DBCO-CY3的另一前沿应用。将短链叠氮修饰的DNA"成像链"与Sulfo-DBCO-CY3标记的抗体偶联,成像链与互补的"锚定链"反复结合-解离,产生荧光"闪烁"信号。通过编码不同的锚定序列,可在同一样品上同时成像数十种靶标,实现真正的多路复用超分辨成像。Cy3的高亮度使每次结合事件产生足够的光子数,确保定位精度不受影响。

在活细胞动态成像中,Sulfo-DBCO-CY3被用于追踪细胞膜蛋白的内吞途径。先用叠氮修饰的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS-N₃)标记细胞表面蛋白,再加入Sulfo-DBCO-CY3进行点击反应,荧光均匀分布于质膜。37°C孵育后,荧光逐渐内化为点状囊泡,通过延时成像可定量分析内吞速率与囊泡运输方向。整个过程无需透膜处理,标记发生在细胞表面,真正实现了"表面特异性、活细胞兼容"的成像。

代谢标记与点击化学的联用进一步拓展了Sulfo-DBCO-CY3的应用边界。将叠氮修饰的非天然氨基酸(如Azido-homoalanine)通过代谢整合入新合成的蛋白质,再用Sulfo-DBCO-CY3点击标记,可实现对蛋白质合成位点的空间分辨。在神经元中,新合成蛋白优先出现在树突棘的颈部区域,这一发现揭示了局部翻译在突触可塑性中的关键作用。

操作注意事项:DBCO基团在酸性条件下(pH<5)可能发生开环,导致点击活性丧失,因此标记反应应在pH 7.0-7.4进行。Cy3的光稳定性中等,强烈激发光下约30秒开始漂白,建议使用低功率激光(<1 kW/cm²)与高灵敏度相机配合。存储于-20°C避光干燥环境,溶液现配现用,DBCO的环辛炔结构在水溶液中会缓慢水解,4°C条件下半衰期约72小时。


关于我们:
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。

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