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HAEGTFTSDVS,864915-61-7,HAEGTFTSDVS Peptide

时间:2026-05-20 16:35:48       浏览:16

在蛋白质组学与酶学研究中,HAEGTFTSDVS(序列:His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser)是一段经过精密设计的多肽探针,其核心价值在于末端的二乙烯基砜(DVS)反应基团与N端组氨酸标签的双重功能设计。CAS号864915-61-7,分子量约1300 Da,这条11肽以其独特的化学活性,成为研究丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶及蛋白质-蛋白质相互作用的利器。

DVS基团的化学捕获机制

二乙烯基砜(DVS, -CH=CH-SO₂-CH=CH₂)是一种双功能亲电试剂,能与亲核性氨基酸侧链发生迈克尔加成反应。其反应选择性*高:在中性pH条件下,DVS优先与半胱氨酸的巯基(-SH)反应,形成稳定的硫醚键;在碱性条件下(pH 9.0-10.0),则可与赖氨酸的ε-氨基和组氨酸的咪唑基反应。这种pH依赖的选择性使研究者能够通过调节反应条件,精准捕获目标蛋白的活性位点。与传统的碘乙酰胺(IAA)烷基化试剂相比,DVS具有不可逆共价结合、反应速率更快、背景干扰更低的优势,特别适合活细胞裂解液中的蛋白酶活性位点标记。

N端His标签的纯化功能

序列首位的组氨酸(His)不仅参与DVS的催化活化,更是一条天然的亲和纯化标签。在反应完成后,未反应的多肽及非特异性结合蛋白可通过Ni-NTA亲和柱一步去除,*大简化了后续的质谱分析流程。这一"反应-纯化"一体化设计,使HAEGTFTSDVS在高通量蛋白质组学筛选中具有显著的操作优势。

在酶底物特异性研究中的应用

HAEGTFTSDVS的中间序列"EGTFTSD"模拟了多种丝氨酸蛋白酶的天然底物识别位点。研究人员可将其作为通用型活性位点探针(ABPP, Activity-Based Protein Profiling),与全细胞裂解液孵育后,通过链霉亲和素富集(若末端偶联生物素),再经LC-MS/MS鉴定,即可一次性筛选出样品中所有具有活性的蛋白酶种类及其相对丰度。这种方法在环境微生物学、工业酶筛选和基础酶学研究中应用广泛。

理化性质与操作要点

产品为白色冻干粉末,纯度≥95%,需-20°C避光干燥保存。DVS基团对水分和高温敏感,建议溶于无水DMSO配制成10-50 mM母液,分装后-80°C保存,避免反复冻融。反应时建议在pH 7.4-8.0的Tris或HEPES缓冲液中进行,反应时间30-60分钟。HAEGTFTSDVS以其双功能设计,在化学蛋白质组学与酶学机制研究中开辟了高效精准的实验路径。


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