DBCO-Sulfo-NHS ester（磺酸基二苯并环辛炔 - 活性酯，CAS：1400191-52-7）是水溶性双功能交联试剂，核心融合无铜点击化学与氨基特异性偶联能力，适配生理环境下的生物分子精准连接。分子由三部分构成：DBCO（二苯并环辛炔）应变环炔基团、磺酸基（-SO₃⁻）亲水修饰、NHS（N - 羟基琥珀酰亚胺）活性酯端，分子式 C₂₅H₂₁N₂NaO₈S，分子量 532.50，常温下为白色固体粉末，-20℃避光干燥储存。 其核心特性在于无铜点击反应（SPAAC） 与氨基偶联的双重活性：DBCO 基团可在无铜、无催化剂条件下，与叠氮化物（N₃）发生环张力促进的炔 - 叠氮环加成反应，生成稳定 1,2,3 - 三唑环，避免铜离子对生物体系的毒性；NHS 酯端在 pH 7.0–9.0 弱碱性环境中，高效特异性结合蛋白质、多肽、抗体的伯胺基团，形成稳定酰胺键；磺酸基显著提升水溶性，可直接溶于水或缓冲液，降低非特异性吸附，提高反应选择性。

 应用聚焦生物偶联与探针构建：在生物分子标记中，用于抗体、多肽、寡核苷酸的氨基修饰，引入 DBCO 基团后可与叠氮标记的荧光染料、纳米材料高效偶联；在生物材料修饰中，对水凝胶、高分子微球、纳米载体表面进行功能化，赋予其点击反应活性，用于后续靶向分子固定；在探针研发中，构建双标记荧光探针，实现生物分子的定位与相互作用研究，适配活细胞成像与复杂生物体系。相较于传统铜催化点击试剂，其无铜特性与水溶性大幅降低生物毒性，是生理条件下生物偶联的优选工具。

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