Mag-Fluo-4 AM，也可写作Mag-Fluo-4 Acetoxymethyl Ester、Mag-Fluo-4 AM Ester、Cell-Permeant Mag-Fluo-4，其中文标准名称为镁荧光探针4-乙酰氧基甲酯（细胞可渗透型），是一款专门针对活细胞内游离镁离子检测设计的高性能荧光探针，在细胞生理过程的离子动态监测领域有着广泛的应用。

该探针的分子结构由两部分核心功能单元组成：负责特异性识别镁离子的Mag-Fluo-4荧光母核，以及赋予细胞膜穿透能力的乙酰氧基甲酯（AM）修饰基团。AM基团的引入大幅提升了整个分子的脂溶性，让原本无法穿透细胞膜的极性荧光母核，可以自由地穿过活细胞的磷脂双分子层，顺利进入细胞内部。

当探针分子进入活细胞后，胞内广泛存在的非特异性酯酶会快速将分子上的AM酯基团水解切除，生成带有负电荷的极性Mag-Fluo-4分子。这种极性产物无法再反向穿透细胞膜，会被长时间滞留在细胞内部，不会发生泄漏流失。而胞外尚未进入细胞的未水解探针，本身几乎没有荧光信号，这一特性*大降低了检测过程中的背景干扰，让最终得到的荧光信号几乎完全来自细胞内部的活性探针。

Mag-Fluo-4荧光母核对游离镁离子具有高度的识别特异性，它的镁离子解离常数约为4.7 mM，完美适配活细胞内生理状态下的镁离子浓度范围（0.1-10 mmol/L）。当探针分子与镁离子结合后，分子内部的光诱导电子转移过程会被阻断，荧光强度会出现数十倍的显著增强，荧光信号的强度与镁离子的浓度呈现良好的线性对应关系，完全可以通过荧光强度的变化精准推算出细胞内游离镁离子的实时浓度。

该探针的激发波长为494nm，发射波长为516nm，呈现明亮的绿色荧光，完全适配常规实验室的FITC检测通道，无需特殊的荧光设备即可完成检测操作。它的荧光响应速度达到毫秒级，可以实时追踪细胞内镁离子浓度的动态波动，捕捉到细胞生理活动过程中镁离子的快速变化过程。同时该探针的化学稳定性良好，常规细胞培养条件下几乎没有明显的细胞毒性，不会干扰细胞正常的代谢与增殖活动，可以支持长时间的活细胞动态监测实验。

日常储存时将其置于-20℃干燥避光的环境中密封保存，使用前再用无水DMSO配制成母液，即可稳定开展各类细胞内镁离子的检测实验，是研究细胞内镁离子稳态调控机制的核心工具试剂。

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