绿色活细胞示踪探针（Green CMFDA，CAS：136832-63-8），别称5-氯甲基荧光素二乙酸酯、细胞追踪绿色荧光探针、细胞狩猎绿色探针，是一类高特异性、长效稳定的活细胞荧光标记试剂，核心用于体外活细胞的长效示踪、增殖追踪、细胞迁移与互作研究，是细胞生物学基础实验的核心耗材。该探针分子结构由荧光素母体、双乙酸酯保护基团与氯甲基活性基团构成，独特的分子结构赋予其“无荧光前体、胞内活化发光、共价结合留存”的核心特性，区别于普通瞬时荧光染料，可实现多代细胞的稳定标记追踪。

其核心作用机制依托细胞内源酶促反应实现特异性活化，未进入细胞的CMFDA分子无荧光活性，不会产生背景干扰，有效规避了非特异性荧光杂讯。当探针自由穿透活细胞膜进入胞内后，活细胞普遍表达的非特异性酯酶会快速水解其乙酸酯保护基团，生成具有荧光活性的氯甲基荧光素中间体。该中间体可与细胞内谷胱甘肽等巯基物质发生共价结合，稳定留存于细胞质中，既不会反向穿透细胞膜流失，也不会扩散至周边未标记细胞，仅随细胞分裂均匀分配至子代细胞，实现连续多代细胞的长效标记，标记时效可覆盖多次细胞传代过程。

在科研实验中，Green CMFDA具备*强的适配性与独特优势，其生物相容性优异，标记浓度范围内无细胞毒性，不会干扰细胞正常增殖、迁移、分化等生理功能，保障实验结果的真实性。该探针激发波长492nm、发射波长548nm，荧光信号清晰稳定、信噪比高，适配荧光显微镜、共聚焦成像、流式细胞检测等主流实验技术。广泛应用于细胞粘附、细胞融合、细胞趋化侵袭、干细胞增殖分化、细胞间物质交换等基础研究场景，同时可与红色、蓝色荧光探针实现多色共标，支撑多细胞体系的互作机制研究。凭借低背景、高稳定、长效标记、无细胞损伤的优势，成为细胞动态行为研究、细胞谱系追踪实验中最常用的核心荧光探针之一。

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