FITC-SH，CAS 编号 111647-39-3，标准中文名称巯基修饰异硫氰酸荧光素，补充英文别名 Thiol-reactive FITC、Fluorescein isothiocyanate thiol probe，是一类靶向巯基（-SH）基团的特异性小分子荧光探针，区别于氨基偶联通用 FITC 染料，分子内置巯基亲和反应结构，专一识别分子游离巯基位点，专注生物大分子巯基位点定量标记、巯基含量光谱检测基础研究。 普通商用 FITC 仅与氨基发生偶联，无法特异性标记巯基，FITC-SH 分子在荧光素母核侧链引入马来酰亚胺类巯基亲和活性基团，保留 FITC 完整荧光发色共轭环，实现荧光发光性能与巯基靶向反应性能一体化整合。

合成流程以荧光素母核为起始原料，分步修饰连接臂与巯基反应活性官能团，全程低温无水避光合成，规避荧光素环开环降解；纯化采用制备型高效液相色谱精细分离同分异构体杂质，产物冻干后为橙黄色固体粉末，质谱、核磁联合确认分子结构与 CAS 编号 111647-39-3 对应结构完全吻合。 分子光学指标稳定，*大激发波长 493nm，荧光发射 526nm，荧光量子产率 0.75，未与巯基结合时游离探针荧光信号稳定，与游离巯基发生迈克尔加成共价结合后，荧光强度无淬灭偏移，仅通过探针分子结合量定量样品总巯基含量。反应条件温和，中性缓冲液室温即可完成标记，不会引发蛋白、多肽高级结构变性，仅靶向游离还原态巯基，对二硫键无反应活性，可区分还原巯基与氧化二硫键。 

该巯基特异性荧光探针用于各类多肽、球状蛋白、多糖衍生物体外游离巯基总量定量测算，混合生物大分子体系巯基位点可视化标记，小分子硫醇类化合物浓度荧光标准曲线构建。相较于传统 DTNB 紫外比色法，FITC-SH 荧光检测背景干扰更低，微量样品即可完成检测，适配微孔板高通量批量样品分析；分子为小分子单荧光基团探针，无分子内 FRET 淬灭效应，检测线性区间宽，浓度适用范围覆盖纳摩尔至微摩尔区间。试剂避光低温储存不易水解失活，水溶液配置后需隔绝空气防止活性基团氧化失活，仅用于体外溶液体系巯基定量标记与光谱分析，是巯基化学、生物大分子修饰基础研究专用靶向荧光染料。

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