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Protonex Red 780 Succinimidyl Ester,Protonex 红 780 活性酯,Protonex Red 780 NHS Ester
Protonex Red 780 Succinimidyl Ester(Protonex 红 780 活性酯)属于近红外波段氨基响应型 pH 敏感荧光标记砌块,融合长波长荧光发色团与琥珀酰亚胺活化酯结构,是构建靶向型 pH 荧光偶联物的核心原料。该染料*大激发波长 748 nm,发射波长 769 nm,落于近红外光学窗口,相比可见光荧光探针,光散射效应更低,光穿透能力更强,适合复杂体系内动态过程追踪。区别于常规荧光指示剂,该分子具备反向质子响应特性,中性、碱性环境荧光信号微弱,随着环境酸度提升,荧光强度显著上升,天然形成背景自淬灭效果。
末端 NHS 活性酯赋予分子生物偶联能力,在 pH 7.2–8.8 弱碱性缓冲条件下,可选择性与多肽、抗体、氨基修饰多糖及蛋白表面伯氨基发生亲核取代,脱去 NHS 离去基团形成稳定酰胺键。分子内部柔性烷基连接臂分隔荧光母核与反应位点,有效消除偶联过程产生的空间位阻,避免大分子挂载后扭曲发色团平面共轭结构,保障 pH 传感功能不受破坏。偶联反应条件温和,无需金属催化,适配水相与有机相混合标记体系。
该试剂最典型的应用方向为胞内吞转运示踪研究。将其标记于膜表面蛋白、靶向配体后,细胞外中性环境下探针几乎无荧光;当配体通过内吞途径进入内体、溶酶体等酸性囊泡,微环境 pH 下降即刻激活荧光信号,无需多次洗涤去除游离染料,大幅简化活细胞动态成像流程。同时近红外光谱区间与蓝、绿、红光通道互不干扰,可与多种可见光荧光探针搭配开展多通道同步观测。
理化性质方面,固体形态需要避光低温密封保存,储备液常用 DMSO 配制,水溶液中 NHS 酯*易水解失活,工作溶液要求现配现用。该染料除生物分子标记外,还可用于氨基化纳米载体表面修饰,制备具备 pH 响应发光特性的纳米示踪材料,监测纳米颗粒胞内转运与囊泡酸化进程,为纳米生物界面研究提供标准化近红外标记工具。

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