Cy5‑Cholera Toxin Subunit B（Cy5‑霍乱毒素 B 亚基），也可记作 Cholera Toxin B subunit‑Cy5、CTB‑Cy5、Cyanine5‑CTB，是将花菁 Cy5 荧光基团与霍乱毒素 B 亚基进行共价偶联得到的荧光标记蛋白复合物。霍乱毒素 B 亚基本身具备靶向结合神经节苷脂 GM1 的固有特性，GM1 广泛分布于各类细胞膜表面，该标记复合物依托这一分子识别能力，把 Cy5 的近红外荧光信号赋予蛋白载体，成为体外膜组分示踪、膜受体定位研究中十分实用的荧光探针工具。

Cy5 属于经典五甲川花菁染料，激发波长 646 nm，发射波长 670 nm，处于近红外区间，该波段可以规避多数生物样本自身的自发荧光干扰，降低背景噪声，提升成像信噪比。未标记的霍乱毒素 B 亚基是五聚体蛋白，多个结合位点可以同时识别多个 GM1 糖脂分子，偶联 Cy5 荧光基团之后，蛋白本身的寡聚空间构象、糖脂识别结合活性可以得到较好保留，不会因为荧光修饰发生大幅度失活，这也是该探针能够广泛应用的基础。

该材料多用于体外细胞样本的膜脂筏标记工作，脂筏是细胞膜上富含胆固醇与鞘脂的微结构域，GM1 是脂筏的标志性糖脂。Cy5‑霍乱毒素 B 亚基可以特异性锚定在脂筏区域，借助共聚焦荧光成像设备，直观观测脂筏在膜上的分布状态、聚集与解离动态变化，助力膜微区结构、膜蛋白组装机制相关基础研究。除细胞层面之外，该标记物还适用于离体组织切片染色，用于观察组织样本中 GM1 糖脂的空间分布模式，辅助解析糖脂与膜蛋白之间的相互作用模式。

在样品制备操作层面，该荧光蛋白复合物对温度、反复冻融较为敏感，常规条件建议分装低温避光保存，光照会加速 Cy5 荧光基团光漂白，实验成像环节需要控制曝光时长，减少荧光淬灭带来的数据偏差。在实验体系配置时，需要根据样本类型优化探针工作浓度，浓度过高会出现非特异性吸附，提升背景信号；浓度过低则荧光信号微弱，难以捕捉成像信号。该探针不用于药理活性评估，主要聚焦膜糖脂识别、细胞表面受体示踪、离体组织荧光染色等基础分子生物学研究场景，为细胞膜微域、糖生物学方向提供可视化检测手段。

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