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Cy5‑Celastrol,中文名称 Cy5‑雷公藤红素,也叫花青素 5 标记雷公藤红素,是将花氰染料 CY5 荧光结构与雷公藤红素小分子进行共价偶联得到的荧光示踪分子。雷公藤红素属于五环三萜类天然小分子,分子内部拥有多个羰基、羟基活性位点,借助化学偶联手段,将 CY5 荧光基团连接至雷公藤红素的活性位点,在保留小分子母体基础骨架前提下,赋予分子近红外荧光读出信号。
雷公藤红素本身属于疏水性天然萜类化合物,水溶性很差,偶联 CY5 基团之后,分子整体依旧偏向疏水,可溶于二甲基亚砜、四氢呋喃等有机溶剂,在水相中容易发生聚集,配置水相工作液时,需要少量有机溶剂助溶,再缓慢滴入水相缓冲体系,减少分子团聚造成的荧光淬灭。产物光谱依旧维持 CY5 特征,激发峰 646nm,发射峰 662nm,但是受三萜骨架分子内相互作用,荧光量子产率会相较游离 CY5‑COOH 出现一定程度下降。
合成制备环节需要控制反应条件,三萜母核对高温、强酸碱环境较为敏感,偶联反应选择温和室温条件,规避强氧化环境,防止雷公藤红素母核结构被破坏。产物需要借助色谱手段完成纯化,去除未反应游离 CY5 染料以及未标记雷公藤红素杂质,游离染料杂质会严重干扰荧光检测结果,必须充分分离。
该标记物主要用于天然小分子的迁移与分布示踪研究,聚焦分子在复合介质当中的分配行为。在载体材料研究中,用来观测雷公藤红素模型分子从聚合物胶束、纳米组装载体当中的释放过程,利用荧光信号定量测算介质当中分子浓度变化,评估载体的负载释放特性。在两相分配体系当中,可研究该三萜分子在有机‑水相界面的分配趋势,解析介质环境对小分子分散行为的影响。样品全程避光保存,冻干固体低温密封存放,避免分子氧化以及荧光基团光漂白。

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