BDP 630/650 Maleimide（BODIPY 630/650 MAL，BDP‑630/650‑MAL，Maleimide‑BDP 630/650），中文名称BODIPY 630/650马来酰亚胺，CAS号2183473‑31‑4，分子量572.39，深色固体粉末，‑20℃避光干燥储存，HPLC‑MS纯度≥95%，溶于DMSO、DMF有机溶剂，激发628nm，发射642nm，摩尔消光系数97000，量子产率0.91，长激发态荧光寿命适配荧光寿命成像FLIM实验。

分子功能单元分为BODIPY远红光荧光母核与马来酰亚胺反应基团。马来酰亚胺对巯基具备高度反应选择性，在pH6.5‑7.5中性缓冲条件下，通过迈克尔加成反应，和半胱氨酸残基的巯基形成稳定硫醚共价键。该反应条件温和，不会破坏蛋白折叠结构，可实现蛋白、多肽分子半胱氨酸位点定点标记，区别于NHS酯随机修饰赖氨酸，巯基标记能够实现位点可控的荧光修饰，便于构建位点明确的荧光蛋白探针。

该染料是荧光寿命成像FLIM的优质工具，BDP 630/650母核荧光寿命较长，当发生FRET效应时，荧光寿命会发生明显衰减，据此可以解析分子间距离信息，研究蛋白复合物相互靠近、解离动态过程。借助定点巯基标记，可以将荧光基团精准安置在蛋白特定位点，降低随机标记带来的信号不均一问题，得到可靠的FRET‑FLIM实验数据。除蛋白标记之外，也可对巯基修饰多肽、巯基改性纳米材料进行远红光荧光功能化，用于多色成像体系，和绿色、橙色波段探针搭配实现多组分同时观测。

实验操作需要重点规避游离巯基杂质，DTT、β‑巯基乙醇等还原剂会快速消耗马来酰亚胺官能团，标记反应体系必须彻底去除还原剂；pH需要控制在中性区间，pH大于8.0条件下马来酰亚胺会发生水解失活；染料水相溶解度有限，先配置有机储备液，再少量滴入缓冲体系。标记结束后需要凝胶过滤纯化除去未反应染料，避免游离染料干扰成像结果。

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