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FITC‑DHA,荧光素标记二十二碳六烯酸的理化特征与脂质通路示踪应用

时间:2026-08-24 14:35:30       浏览:4

FITC‑DHA(荧光素标记二十二碳六烯酸),英文别名Fluorescein‑Docosahexaenoic Acid、DHA‑FITC、FITC‑Docosa‑4,7,10,13,16,19‑hexaenoic acid,是共价偶联异硫氰酸荧光素的多不饱和脂肪酸荧光类似物,将DHA长链多不饱和疏水碳链与FITC荧光发色团结合,属于脂溶性荧光探针,专门用于脂质代谢、脂肪酸转运相关体外科研实验。DHA母体拥有6个不饱和双键,分子具备强疏水性,偶联FITC之后,分子同时保留长链疏水脂质结构与绿色荧光报告基团,作为DHA的荧光类似物,模拟天然脂肪酸在细胞体系当中的转运、分配行为。

该化合物外观多为淡黄色蜡状固体,脂溶性特征明显,易溶于DMSO、氯仿、二氯甲烷等有机溶剂,在纯水体系中溶解度很差,实验操作一般先配置有机母液,再缓冲液稀释使用;荧光参数激发波长495nm,发射波长519nm。分子结构当中既存在FITC荧光基团,又含有大量不饱和碳碳双键,对光照、氧气、高温都比较敏感,光照会造成FITC光漂白,氧化环境会引发DHA碳链双键氧化断裂,破坏分子完整结构。因此储存条件严格要求‑20 ℃密封避光,惰性气体保护,规避反复冻融,母液建议分装保存,减少多次开盖接触氧气与光照。合成上一般通过酰胺键实现DHA与FITC的偶联,引入短烷基连接臂,减少荧光染料大基团对脂肪酸碳链生理行为的干扰;纯化后通过质谱确认分子量,荧光光谱、薄层色谱共同完成产物质控。

该探针是研究细胞脂质转运的重要工具,在活细胞成像实验中,FITC‑DHA可以被细胞摄取,参与胞内脂质分配,利用共聚焦显微镜,能够直观观测该类似物在脂滴、内质网、线粒体等细胞器之间的转运过程,追踪脂肪酸在胞内的迁移路径,解析脂肪酸的胞内转运动力学,可结合脉冲‑追踪实验方案,观测脂肪酸的动态周转过程。在细胞模型上,该探针可用于探究外界刺激、基因扰动对脂肪酸摄取、胞内重分布带来的影响;在体外膜体系研究中,FITC‑DHA可用于模拟不饱和脂肪酸在磷脂双分子层当中的嵌入行为,借助荧光信号检测脂肪酸与人工脂质膜之间的相互作用,研究膜组分对不饱和脂肪酸结合能力的影响。该探针还可用于脂蛋白相关体外研究,探究不饱和脂肪酸与脂蛋白颗粒之间的结合、交换行为,定量分析脂质分子在不同脂蛋白组分之间的分配比例。


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