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异硫氰酸荧光素‑聚乙二醇‑巯基,Fluorescein‑PEG‑Thiol的合成制备

时间:2026-08-24 15:46:26       浏览:4

异硫氰酸荧光素‑聚乙二醇‑巯基,英文名称Fluorescein‑PEG‑Thiol(FITC‑PEG‑SH)。该分子属于不对称双官能团聚乙二醇衍生物,分子一端共价偶联异硫氰酸荧光素荧光基团,另一端携带游离巯基(‑SH),中间由柔性PEG链段隔开,外观随分子量变化呈现黄色固体或者粘稠液体,激发波长494nm,发射波长521nm,可输出绿色荧光信号,可溶于水、DMSO、DMF、二氯甲烷等多种溶剂,分散系数PDI≤1.05,荧光基团取代率、巯基取代率均可达到90%以上。

合成制备主要分为两大阶段,首先制备单端巯基修饰聚乙二醇中间体,再将中间体氨基端与FITC异硫氰酸酯基团在弱碱性条件下发生偶联,生成稳定硫脲键,得到粗产物;后续借助透析、凝胶过滤色谱、超滤手段除去未反应游离荧光染料与小分子杂质,再利用核磁共振氢谱、MALDI‑TOF质谱、紫外光谱完成结构与取代度表征,确认产物纯度,整个合成流程需要规避强氧化剂,防止巯基提前氧化生成二硫键造成官能团失活。巯基基团对金、银等贵金属表面具备*强亲和作用,能够自发在贵金属界面形成稳定硫醇‑金属配位键,因此该试剂大量用于贵金属纳米颗粒、金薄膜表面的荧光功能化修饰。将FITC‑PEG‑SH与金纳米颗粒混合孵育,巯基端锚定在金颗粒表面,PEG链向外伸展,荧光基团暴露于外侧,一方面依靠PEG链提升纳米颗粒水相分散能力,抑制颗粒聚集,另一方面引入荧光信号,实现贵金属纳米材料的荧光可视化追踪,方便借助荧光显微镜观测纳米颗粒的分布状态。

储存条件需要‑20℃干燥避光,建议充入氮气隔绝氧气,减少巯基氧化;试剂反复冻融会加速巯基失活,最好分装成小规格储存,每次取用一份。在修饰实验操作时,反应体系尽量除去溶解氧,必要时通入惰性气体,避免巯基氧化交联带来副产物。该试剂把荧光标记能力、PEG亲水改性能力、巯基金属锚定能力集成于同一个分子,为贵金属纳米材料界面功能化提供模块化的合成砌块,简化荧光纳米复合物制备流程,无需多步拼接,单步即可完成材料表面亲水改性与荧光标记双重效果。


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