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Alexa Fluor700 Transferrin,Alexa Fluor700转铁蛋白,别名AF700‑Tf、Transferrin‑AF700,为Alexa Fluor700荧光染料共价修饰转铁蛋白得到的荧光蛋白偶联物。转铁蛋白是球状铁结合糖蛋白,分子自带特定金属结合口袋,能够可逆结合铁离子;Alexa Fluor700属于远红外荧光染料,激发696 nm,发射719 nm,处于长波远红区间,该波段体系自身自发荧光干扰*低,染料具备良好水溶性,抗光漂白性能优异。染料通过酰胺键共价接枝在转铁蛋白表面赖氨酸残基位点,制备完成后保留转铁蛋白本身的蛋白折叠结构与金属结合能力。
标记工艺中,需要规避染料修饰位点落入转铁蛋白的铁结合功能区域,若铁结合口袋附近的赖氨酸被大量修饰,会直接削弱蛋白结合金属离子的能力。因此标记度需要精准管控,既保证足够荧光亮度,又*大程度保留蛋白原有功能。完成偶联之后,通过尺寸排阻分离游离染料,得到纯化后的荧光偶联产物。
该探针主要面向体外材料界面蛋白吸附、蛋白‑高分子相互作用研究。转铁蛋白作为模式球状糖蛋白,经常被用于研究固相高分子材料表面的蛋白吸附行为,AF700的长波长荧光可以规避短波长荧光基团遇到的基质背景荧光干扰,通过荧光强度定量固相表面吸附的转铁蛋白分子数量,解析不同高分子涂层对蛋白的吸附与排斥效果。也可用于研究金属离子与蛋白结合过程的体外荧光监测,借助荧光信号变化反映蛋白分子所处微环境改变。
储存条件‑20 ℃避光密封,蛋白溶液分装冻存,杜绝反复冻融,反复冻融易引发蛋白聚集沉淀。配置工作液使用中性缓冲盐,避免强酸强碱环境,防止蛋白变性。操作全程避光,减少染料光漂白。该远红外标记转铁蛋白,作为长波长模式蛋白探针,为高分子界面蛋白行为研究提供重要检测工具。

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