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Alexa Fluor555‑Tyramide,AF555酪胺,AF‑555‑Tyramide信号放大荧光标记试剂

时间:2026-08-31 16:06:40       浏览:7

Alexa Fluor555‑Tyramide(AF555酪胺),也被称作Alexa Fluor 555 Tyramide、AF‑555‑Tyramide,是一款基于酪胺信号放大技术开发的橙红色荧光标记底物,依托辣根过氧化物酶的催化作用完成原位荧光沉积标记,广泛用于样本的多色荧光示踪与信号增强实验。该荧光底物的激发波长处于555 nm,发射波长可达565 nm,光谱区间处于橙红荧光波段,荧光亮度高,光稳定性表现优异,相比传统罗丹明类酪胺底物,抗光漂白能力得到明显提升,能够满足长时间显微成像采集需求。

Alexa Fluor555‑Tyramide(AF555酪胺)的作用机理依托酪胺信号放大原理,体系内辣根过氧化物酶可以催化酪胺基团发生氧化活化,生成高活性的自由基中间体,活化后的酪胺分子会快速共价结合在酶周边的蛋白残基位点,大量荧光分子定点沉积在靶标所在局部区域,实现靶标信号的成倍放大。该标记模式无需抗体直接携带大量荧光基团,规避了大分子抗体带来的空间位阻问题,对低丰度靶标物质具备十分突出的检测优势,适合处理信号微弱的样本体系。

该试剂适配多种样本处理体系,可用于石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片等固相样本的标记操作,能够和其他不同光谱的酪胺荧光底物搭配开展多通道同步标记,实现多个靶标的区分观测。试剂本身水溶性良好,可直接稀释于常规缓冲溶液中使用,无需复杂有机溶剂助溶,操作流程简单可控。在实验操作过程中,需要把控孵育时长与酶活性状态,孵育时间过长容易造成非特异性背景升高,孵育不足会造成信号强度偏低,同时需要避光保存工作液,防止荧光基团提前光降解。

在材料科研应用层面,该底物除生物样本标记之外,也可用于固相载体表面的位点标记,借助酶促沉积在改性基底上构建荧光图案,用于微结构表征、界面位点示踪研究。分子结构上荧光染料与酪胺基团通过稳定连接臂相连,共价结合之后荧光基团不易发生解离流失,成像结果重复性好。储存条件需要避光低温密封存放,避免反复冻融,*大程度保障染料活性,减少批次之间实验偏差。


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