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AF647-DBCO的完整英文名称为Alexa Fluor 647-Dibenzocyclooctyne,也可记作AF647-Dibenzocyclooctyne、Alexa Fluor 647 DBCO,中文标准名称为AF647荧光染料-二苯并环辛炔。它将发射波长位于近红外区间的AF647荧光染料与无铜点击反应活性的DBCO基团共价结合,是一种兼具近红外高亮度荧光特性与无铜点击反应活性的功能荧光探针,完美适配复杂胶体体系中的高信噪比荧光示踪需求。
传统的可见光区荧光探针在复杂胶体体系中进行示踪时,很容易受到体系中杂质分子的自发荧光干扰,激发光的穿透深度也很浅,很难实现高浓度胶体悬浮液内部的动态观测。而AF647荧光染料的*大发射波长位于665nm的近红外区间,该波段远离大多数有机杂质的自发荧光范围,体系的背景荧光干扰*低,同时近红外光在水相胶体体系中的穿透深度远高于可见光,能够实现高浓度悬浮液内部的深层荧光探测。搭配上DBCO基团的无铜点击反应活性之后,该探针可以在完全不添加铜催化剂的温和条件下,与叠氮修饰的目标胶体颗粒发生高效定点标记,不会对胶体颗粒的分散稳定性造成任何破坏。
在胶体颗粒的标记过程中,AF647-DBCO的反应条件极其温和,仅需要在室温的水相缓冲体系中与叠氮修饰的胶体颗粒混合,数小时内就可以完成高效标记,不需要额外添加任何催化剂,也不需要进行加热、调节极端pH等操作。整个标记过程不会改变胶体颗粒的表面电荷与粒径分布,完全避免了传统共价标记方法容易引发胶体颗粒团聚的问题。同时DBCO基团与叠氮基团的反应特异性*强,几乎不会发生非特异性吸附,标记完成后仅通过简单的离心洗涤就可以完全去除未反应的游离探针,得到荧光背景*低的标记胶体颗粒。
在胶体体系的动态示踪研究中,利用AF647-DBCO标记后的胶体颗粒,可以通过共聚焦激光扫描显微镜直接观测到高浓度胶体悬浮液内部颗粒的三维运动轨迹,精准追踪胶体颗粒在多孔介质中的迁移、沉积过程,获取传统表征手段无法得到的单颗粒级动态传质数据。这种高信噪比的近红外荧光示踪方法,彻底解决了长期以来高浓度胶体体系内部动态过程难以直接观测的行业痛点,在胶体科学、环境传质研究等领域都成为了极其重要的实验工具,为相关基础研究的突破提供了关键的技术支撑。

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