NHS-Diazirine，NHS-双吖丙啶，CAS号1239017-80-1，Diazirine-NHS，Succinimidyl diazirine，3-(trifluoromethyl)diazirine benzoic acid NHS ester，是带有三氟甲基双吖丙啶光活性基团的苯甲酸NHS活性酯衍生物。分子包含芳香苯环、三氟甲基取代双吖丙啶三元环光响应结构，以及末端NHS活性酯；NHS活性酯用于共价偶联氨基底物，双吖丙啶环属于光可激活官能团，在特定波长紫外光照射下，会释放氮气，生成高活性卡宾中间体，卡宾可以和邻近各类C-H、N-H键发生非特异性共价键合。

三氟甲基的引入提升双吖丙啶基团稳定性，在避光常规条件下分子化学性质稳定，不会自发发生分解；只有在紫外光激发条件下才会触发反应，实现时间可控的交联捕获。NHS活性酯的偶联反应可在避光弱碱性缓冲体系完成，先把分子偶联到氨基底物上，固定探针位置，后续再进行紫外光照，启动光交联捕获邻近分子，两步操作相互独立。

该分子需要全程避光储存与操作，光照会提前激活双吖丙啶环，造成探针提前分解失效。固体样品低温密封避光保存，工作液现配现用。偶联阶段严格避光，完成探针修饰之后，再开展紫外光激发，光照时长与紫外功率需要优化，光照不足双吖丙啶转化不完全；光照过强会引发体系内其他分子光损伤，产生非目标副反应。

分子带有芳香环与三氟甲基，疏水特性较强，配制溶液常需要添加少量有机助溶剂。光交联完成之后，体系内未反应探针可以使用色谱分离手段去除。探针修饰密度需要合理调控，过高修饰量会增加背景捕获信号，干扰结果分析；修饰量不足，捕获效率偏低。

该分子集成氨基靶向偶联位点与光触发卡宾交联基团，作为光交联探针砌块，先通过NHS酯标记氨基底物，再用光激活实现邻近分子捕获，用于分子间相互作用的捕获研究，借助光控共价捕获，捕捉瞬时存在的分子相互作用体系。

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