Protonex Red 780 NHS ester，Protonex Red 780 NHS酯，属于近红外二区发射的pH响应荧光探针，分子结构集成NHS琥珀酰亚胺活性酯，能够对含伯氨基的底物进行共价荧光修饰。探针的荧光母核属于近红外二区发色体系，相较于可见光、近红外一区荧光分子，该波段荧光具备更长的发射波长，光学信号在复杂分散体系中，光散射、自发荧光背景干扰会显著下降，信号穿透能力更强。

探针的pH传感特性来源于发色团上可质子化的官能位点。体系氢离子浓度改变，会引发分子内电荷转移效应变化，直接调控近红外二区荧光发射强弱。当环境pH发生变化，分子质子化状态切换，对应的荧光量子产率随之改变，将酸碱度信息转化为可采集的近红外光学信号。NHS活性酯基团可以和底物伯氨基发生偶联反应，在温和条件下，将整套近红外pH传感发色骨架共价固定在目标分子上，避免探针游离扩散，提升传感体系稳定性。

偶联反应过程对反应体系pH、试剂浓度、反应时长较为敏感。水环境会造成NHS基团水解，所以实验操作一般先使用无水有机溶剂溶解探针储备液，再加入缓冲体系启动标记反应。共价修饰完成后，探针分子保留完整的pH响应特性，标记产物的近红外二区荧光可以反馈其所处微环境酸碱度变化。长波长近红外二区荧光的优势，使其在高浊度、复杂多组分体系检测场景拥有突出优势，大幅降低基质背景荧光干扰。

该探针可用于制备带有pH传感功能的近红外标记生物偶联物，也可用于氨基修饰高分子、纳米载体表面功能化修饰，构建具备pH响应发光特性的纳米组装体系。在多探针联合实验中，该探针的光谱波段可与可见光、近红外一区荧光探针实现光谱分离，搭建多通道同步传感方案。

该化合物储存要求严格，需要低温避光隔绝水汽保存。近红外发色团普遍存在光敏感性，长时间强光照射会造成光降解，破坏荧光性能；水汽会快速消耗活性酯基团，丧失标记能力。开展实验前，需要标定探针的pH响应区间，匹配待测体系酸碱度范围，保证光学信号与pH值之间具备稳定对应关系。

Protonex Red 780 NHS ester将近红外二区发光、pH传感以及氨基靶向共价偶联能力结合在一起，拓展了pH荧光探针的应用边界。依托长波长荧光独特的光学优势，这类共价可标记型近红外二区pH探针，为复杂体系微环境酸碱度的光学探测提供新研究工具。

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