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ReadiCleave Cy5 NHS ester,ReadiCleave可裂解Cy5‑NHS酯,是引入可断裂连接臂的Cy5荧光活性酯衍生物,分子同时包含Cy5远红外荧光发色团、可化学裂解连接单元以及NHS琥珀酰亚胺活性酯基团。普通Cy5-NHS酯完成标记之后,荧光发色团与底物之间形成稳定化学键,很难实现二者分离;而ReadiCleave Cy5 NHS ester在荧光母核与活性酯之间嵌入可裂解连接结构,在特定化学条件下,连接臂发生断裂,实现荧光标签与目标底物的可控分离。
NHS活性酯部分保留经典氨基偶联反应特性,弱碱性缓冲环境下,可与底物分子表面伯氨基发生共价偶联,把整套带可裂解连接臂的Cy5荧光单元连接至目标分子。偶联反应条件温和,不会轻易破坏底物本身结构,反应选择性优先针对伯氨基。水环境会逐步水解NHS活性酯,标记反应需要控制反应时长,储备液采用无水有机溶剂预溶,减少水解副反应带来的试剂损耗。
共价标记完成后,Cy5荧光基团可正常输出远红外荧光信号,用于示踪、检测等研究操作。当实验需要移除荧光标签时,施加对应的裂解条件,分子内可裂解连接臂发生选择性断裂,Cy5荧光片段从底物分子上脱离,底物本身骨架保留完整。该可控解离特性是该分子*核心特点,区别于常规不可裂解荧光活性酯,能够实现“先标记示踪,后脱除标签”的实验流程。
Cy5荧光的光谱处于远红外波段,样品基质自发荧光干扰低,适配各类荧光检测与成像设备。该衍生物可用于蛋白、多肽、氨基修饰高分子的荧光标记,构建可脱除荧光标签的生物偶联物;也可以用于固相载体表面修饰,制备带有可裂解荧光标记的功能材料。在需要去除荧光标签、还原底物原始结构特性的研究场景中,该分子的优势十分突出。
试剂储存需要低温避光密封保存,一方面防止NHS活性酯遇水汽水解失效;另一方面避免Cy5荧光母核光照降解,同时规避不当储存提前触发可裂解连接臂断裂。在实验设计阶段,需要提前验证裂解条件对目标底物的影响,选择合适裂解试剂、反应温度与时间,保证裂解高效且不会破坏底物骨架。
ReadiCleave Cy5 NHS ester融合Cy5远红外荧光标记能力、氨基靶向偶联活性酯与可控裂解连接臂,打破传统荧光标记只能共价固定无法脱除的局限,为荧光标记研究提供可去除标签的全新方案。这类带可断裂连接单元的荧光活性酯衍生物,在需要分步标记与标签剥离的基础研究方向拥有丰富应用潜力。

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