DIO-LNP，中文名称：DiO标记脂质纳米粒，英文别名：DiO-Lipid Nanoparticle、DiO labeled LNP、DiO doped lipid nanoparticle。该体系是将亲脂性羰花青染料DiO嵌入脂质双分子层骨架得到的荧光标记纳米组装体系，DiO依靠疏水烷基链锚定在脂质疏水区域，不会破坏脂质纳米粒的核壳组装结构，将纳米颗粒赋予绿色荧光信号，用于纳米载体的颗粒示踪、膜结构完整性与纳米组装行为研究。DiO属于脂溶性荧光分子，在水相游离状态荧光*弱，嵌入脂质疏水微环境后荧光显著增强，这种环境依赖性发光特性，可用来区分游离染料与组装在纳米颗粒内部的荧光单元。

DiO的光物理行为高度依赖所处介质的疏水环境，*大吸收484 nm，发射波长501 nm，在脂质疏水微环境中荧光量子产率稳定。制备过程中，DiO在脂质相加入，伴随纳米沉淀过程嵌入脂质层，染料固定在疏水链区域，不会轻易释放到外部水相。染料掺杂比例需要严格控制，过高掺杂浓度会引发染料分子聚集，产生荧光自淬灭，降低检测信号；掺杂量过低则信号强度不足，因此需要优化染料与总脂质的摩尔比例，兼顾荧光亮度与纳米颗粒理化稳定性。标记之后，纳米粒的粒径、Zeta电位、胶体分散性基本保持不变，保留原有脂质组装体的胶体特性。

该体系主要用于纳米组装体的胶体稳定性与胞内转运示踪研究。借助荧光共聚焦成像、流式检测，可追踪纳米颗粒在分散体系中的分布，观测颗粒与膜结构相互作用过程，判断纳米组装体是否发生膜融合、颗粒解离。利用FRET配对实验，将DiO作为供体，搭配DiI作为受体标记，可监测脂质纳米粒与其他囊泡结构之间的膜融合动态，评估纳米颗粒膜结构完整性。还可以通过荧光光谱监测不同缓冲盐浓度、pH条件下荧光信号变化，研究环境因素对脂质纳米组装体解离、聚集行为的调控规律。

该纳米组装体系属于胶体分散体系，储存条件对颗粒稳定性影响显著，需要避光低温保存，避免剧烈震荡引发颗粒聚集沉降。DiO虽然锚定在脂质层，但长时间放置或者高盐环境下，少量染料会缓慢泄漏，造成背景荧光升高，因此样品不宜长期存放，工作液建议新鲜制备。体系中有机溶剂、表面活性剂会破坏脂质双分子层结构，导致染料释放，光谱测试需要严格控制体系组分。多色成像实验中，DiO绿色通道可搭配DiD、DiR标记的纳米颗粒，实现多种纳米组装体并行追踪。

DiO标记脂质纳米粒为脂质基纳米组装体的可视化研究提供可靠方案，解决裸LNP无法直接光学观测的短板，为纳米胶体稳定性、膜相互作用、纳米颗粒转运动力学研究提供成像与光谱数据。这类脂溶性染料掺杂的纳米组装体系，在纳米材料组装、囊泡互作、胶体化学领域具备持续探索价值。

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