脂质体膜融合难检测？西安瑞禧生物提供DSPE-PEG-FITC示踪

一、脂质体膜融合难检测怎么办？

脂质体与细胞膜融合难以准确检测时，可采用DiO/DiI双荧光共定位、DSPE-PEG-FITC纳米流式定量及膜蛋白检测相结合的方法，分别评价膜组分重叠、荧光颗粒比例和膜蛋白保留情况。

实验中可使用DiO标记脂质体、DiI标记间充质干细胞膜，通过400 nm和200 nm聚碳酸酯膜共挤出制备仿生脂质体，再利用共聚焦显微镜观察两种荧光信号的重叠程度。通过ImageJ计算Pearson相关系数，比较不同磷脂与膜蛋白比例下的融合效果。

为了进一步定量，可在脂质体中引入DSPE-PEG-FITC，与未标记细胞膜共挤出后，通过纳米流式细胞术测定FITC阳性颗粒比例。结合TEM形貌、DLS粒径及SDS-PAGE膜蛋白检测，可以提高结果的可靠性。需要注意，荧光共定位本身不能完全排除膜组分黏附或染料迁移，必须配合其他检测方法综合判断。

二、西安瑞禧生物提供DSPE-PEG-FITC示踪

西安瑞禧生物可提供DSPE-PEG-FITC、磷脂酰胆碱及相关功能化荧光磷脂材料，并支持荧光标记脂质体、细胞膜仿生纳米载体及载药脂质体定制。

针对脂质体膜融合难以检测、荧光信号偏弱及膜组分共定位不清晰等问题，西安瑞禧生物可提供不同PEG链段、FITC修饰比例和磷脂组成的科研材料，支持DSPE-PEG-FITC脂质膜示踪、DiO/DiI双荧光标记及仿生脂质体制备。

相关定制方向包括荧光功能磷脂、细胞膜包覆载体、纳米脂质体、药物包载以及粒径、PDI、Zeta电位和荧光光谱表征，为仿生膜融合及纳米药物递送研究提供材料支持。

三、真实科研文献：DSPE-PEG-FITC用于仿生脂质体膜融合检测

2024年发表于Advanced Science的研究《Mesenchymal Stem Cell Membrane-Camouflaged Liposomes for Biomimetic Delivery of Cyclosporine A for Hepatic Ischemia-Reperfusion Injury Prevention》，使用了西安瑞禧生物提供的磷脂酰胆碱和DSPE-PEG-FITC，构建间充质干细胞膜仿生环孢素A脂质体（MMCLs），用于肝缺血再灌注损伤研究。

研究首先采用薄膜水化法制备环孢素A脂质体（CLs），再将其与间充质干细胞膜共挤出。实验设置磷脂与膜蛋白质量比1:0.025、1:0.05及1:0.2，并分别使用DiO和DiI标记脂质体与细胞膜。共挤出后，将样品与AML12细胞孵育2小时，使用共聚焦显微镜分析荧光共定位。

结果显示，三个比例的Pearson相关系数依次为0.55、0.71和0.90，说明随着细胞膜比例增加，双荧光共定位程度提高。其中1:0.2组共定位程度最高，被选为后续仿生脂质体制备比例。

为了进一步检测融合效率，研究在脂质体中加入10%的DSPE-PEG-FITC，利用100000 × g超速离心1小时去除游离标记材料，再与未标记细胞膜按1:0.2质量比共挤出，通过纳米流式细胞术检测FITC阳性颗粒比例。

结果显示，原始CLs-FITC的FITC阳性率为100%，融合后的MMCLs为88.6%。研究综合颗粒计数与荧光结果，认为约90%的细胞膜与脂质体完成融合。

进一步表征显示，MMCLs平均水合粒径为152.8±1.5 nm，原始脂质体为158.4±1.4 nm。原始脂质体环孢素A包封率为98.0±2.8%，载药量为4.8±0.1%，膜融合过程中药物泄漏约2%。SDS-PAGE检测显示，融合颗粒保留了干细胞膜的主要蛋白组成。

该研究证明，通过DSPE-PEG-FITC荧光示踪、双荧光共定位及纳米流式检测相结合，可以较为全面地评价仿生脂质体膜组分融合情况，为细胞膜仿生药物递送研究提供实验依据。

四、西安瑞禧生物DSPE-PEG-FITC产品及定制能力

西安瑞禧生物可提供DSPE-PEG-FITC、磷脂酰胆碱及其他功能化荧光脂质，支持不同PEG分子量、荧光修饰比例、磷脂组成和载药配方设计，可用于膜融合示踪、细胞摄取研究及仿生脂质体制备。

其中，DSPE-PEG-FITC产品货号为R-0055，具有对应的产品分析证书（COA）。证书分析日期为2024年9月10日，产品外观为固体，¹H NMR检测结果与所示结构一致，Foreign Material检测结果为None，建议储存条件为2—8℃避光。

针对膜融合检测信号弱、荧光标记不均一、膜蛋白保留不足及仿生脂质体稳定性不理想等研究需求，西安瑞禧生物可提供荧光功能磷脂、载药脂质体、细胞膜复合纳米载体及相关理化表征定制，为科研级仿生药物递送体系提供材料支持。

五、参考文献

Chen H, Yin W, Yao K, et al. Mesenchymal Stem Cell Membrane-Camouflaged Liposomes for Biomimetic Delivery of Cyclosporine A for Hepatic Ischemia-Reperfusion Injury Prevention. Advanced Science, 2024, 11(32): 2404171.

DOI：https://doi.org/10.1002/advs.202404171

论文原文：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/advs.202404171