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FpAT的氨基酸序列为H-Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-Arg-OH
采用Fmoc固相合成方法得到小肽FpAT,然后经PEG修饰得到PEG-FpAT。首先将第一个氨基酸偶联到固相载体上,然后逐步偶联后续氨基酸,依照肽序将FpAT所有的氨基酸偶联完后,再利用三氟乙酸(TFA)将肽序从固相载体上切割下来,然后进行PEG化修饰,最后利用HPLC进行纯化得到PEG- FpAT。
抗肿瘤小肽FpAT的聚乙二醇衍生物:
其结构是在FpAT的N-端、C-端连上半胱氨酸,偶联上有马来酰亚胺基聚乙二醇、乙烯基聚乙二醇或碘代乙酰基聚乙二醇,或在FpAT的N-端氨基、C-端羧基以及其天冬氨酸或谷氨酸侧链羧基上偶联聚乙二醇,得到:
产物一:PEG-M- Cys-FpAT
产物二:FpAT-Cys-M-PEG
产物三:PEG-X- (CH2) mCO-NH-FpAT
产物四:FpAT- [C0-X- (CH2) m-PEG] z
将PEG-NH,分别与马来酸酐、乙烯基氯化亚砜、碘代乙酸酐反应得到马来酰亚胺基聚乙二醇、乙烯基聚乙二醇、碘代乙酰基聚乙二醇。其中马来酰亚胺基聚乙二醇可通过如下反应制备:
产物五:IA-PEG-FpAT
产物六:mal-PEG-FpAT
产物七:vinyl-PEG-FpAT
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