泡囊的几种不同制备方法

泡囊又称囊泡、类脂质体或非离子型表面活性剂泡囊，具有封闭的双层结构，双层壳层内外均是亲水基团，空腔的中心可容纳水性介质，夹在双层亲水基团中间的是疏水基团。

泡囊可由两亲性线形嵌段共聚物在溶液中自组装形成，称为聚合物泡囊(polymer vesicles或polymersomes)，它的疏水段更长，因此它比由一般非离子型表面活性剂形成的泡囊物理稳定性更高。本文讨论的作为药物载体的泡囊主要指聚合物泡囊。

泡囊同胶柬的关系：

两亲性嵌段共聚物在溶液中可以自发形成胶束，亦可形成共聚物泡囊，有人认为主要取决于共聚物分子中亲水段(如POE或PEG)所l与的体积比(fEo)。当0．2．42时因疏水段很长易形成疏水核心的管形(亦称虫形)的聚合物胶束；0．42<‰<0．5时疏水段长度适当，易聚集成疏水核心的夹层外壳、中心为亲水空腔的聚合物泡囊，fEo>0．5时亲水段很大，形成锥形分子，然后形成聚合物胶束。

泡囊的制备方法

1、 薄膜分散法：

先将材料溶液蒸发成薄膜，再加水性介质采用手摇、搅拌或超声分散形成泡囊，是制备泡囊最常用的方法，操作步骤不尽相同，其泡囊多为多事型，对水溶性药物的包载量低于单室型，而释放则相对较缓慢。可以先制备泡囊，再包载药物，如以PEG为亲水段，同以PLA或PCL作疏水段聚合成的ABC，可形成聚合物泡囊，用以包载药物多柔比星(DOX)。将共聚物的氯仿溶液在氮气氛下蒸发成薄膜，再真空干燥除净氯仿，加硫酸铵溶液使薄膜水化，并温育促进泡囊的自组装，再透析除盐后，将药物溶液加入，温育使药物

进入泡囊，再用PBS透析除去剩余药物，即得DOX聚合物泡囊混悬液。由不同相对分子质量的共聚物可以得到粒径从100 nm～10斗m的聚合物泡囊。体外释药试验表明，随着疏

水段(PLA或PCL)的水解，释药逐渐加速，并认为其释放是由水解后在泡囊内形成微孔而启动的。

也可以形成泡囊和包载药物同时进行，如卡铂泡囊的制备，将Span溶于乙醚，减压旋转蒸发除去乙醚得薄膜，加溶有卡铂的缓冲液振摇得泡囊的混悬液。加甘露醇后制成冻

干品备用。加水后再分散性好，泡囊平均粒径3．72斗m，径距0．66，包封率29．2％，体外释药tl／2比原药延长9．14倍，有明显的缓释性。动物试验表明，泡囊的最大摄取率以肺最大(为3．43)，靶向效率增加0．5～9倍(对不同器官)，峰浓度比以肺最大(1．5倍)，说明肺靶向性显著(而原药主要分布于血液中)，肺AUC为原药的3．4倍，而且毒性也比原药降低(LD。增大)。如流感病毒疫苗泡囊的制备，将Span 40或Span 60、胆固醇、磷酸二鲸蜡酯(DCP)溶于氯仿后，60～65℃旋转蒸发形成薄膜，再通氮除氧得干膜，加PBS于60℃将膜水化，于室温同流感病毒疫苗滚动温育再超声，在氮气氛下用聚碳酸酯薄膜过滤除去大粒，再超离心分离，冻干。试验结果说明疫苗制成泡囊后活性并未丧失。包封率结果：用Span 60者均高于Span 40，含胆固醇愈多包封率愈高。粒径：用Span 60者(263±56)nm，用Span 40者(341±91)nm。体外释放含Span 60的释放较快，释放65％约需24 h，含Span40的释放65％约需48 h。

2、逆相蒸发法：

逆相蒸发法先制备乳状液，蒸发除去有机溶剂后可获得大单窜泡囊，因其水性空腔容积较大，包封率也较高，但释药比多室泡囊要快一些。如紫杉醇在氯仿中易溶，在水中不溶，对多种肿瘤有良好的治疗作用，但毒副作用严重，故研制其泡囊。采用逆相蒸发法避光进行。先将胆同醇、DCP、Q-生育酚(31：7：2)和紫杉醇溶于氯仿中减压蒸发形成脂质膜，加乙醚溶解，加聚山梨酯60或80的Tris／HCl缓冲液，超声成0／w型乳状液，减压除去乙醚至形成水混悬液，通氮除尽乙醚，冰浴超声，得泡囊。粒径7 tun以下的占93％，药物包封率为98％。亦可将有机相先制成凝胶，再分散成O／W型乳状液。如将药物水溶液2 Inl加材料的乙醚溶液20 Inl，于4℃超声乳化成W／O型乳状液，室温下使乙醚蒸发得稠厚凝胶，加3 ml PBS漩涡混合成混悬液，再室温同旋蒸发15min，得载药泡囊混悬液。

3、挥发性溶剂注入法：

将材料溶于乙醚或无水乙醇，用注射器以适当速度注入搅拌下含药物的缓冲液中制备。多得小单室泡囊，包封率较薄膜分散法高。如将Span(或再加胆固醇和DCP)溶于乙醚，用注射器缓缓射入溶有氟尿嘧啶的PBS中，室温搅拌一定时间即得载药的泡囊混悬液。结果显示，泡囊粒径小于10“m，用Span40或60得的泡囊体外6 h的释放度稍小于用Span 20或80得的泡囊，以用Span 40的释放最慢，仅由Span 40得的泡囊平均粒径约8舭n，材料中加胆固醇的使平均粒径降低，包封率和释放度也降低，而材料中再加入DCP，则粒径、包封率及释放度均进一步降低(这几种影响因素的实验结果，不同的报道并不一致)。但加有DCP的泡囊负电荷增多，认为有利于问癌细胞的结合发挥抗癌药的疗效。药物的包封率随材料的浓度增大而直线升高。同原药溶液相比，经包载后药物静注后在肝、肺、肾中的分布升高，而在肠中的分布降低，血药浓度表现出缓释特性，药动学参数改变，消失半衰期和AUC增大，分布体积降低。

4、乳化法：

将少量水相与较多量的材料有机溶液乳化制成W／O型乳状液，再加较大量水相进行第二次乳化得W／O／W型复乳，再蒸发除去有机溶剂可得泡囊。可以制得单室型泡囊。有人应用此法但以流动导管制备，导管外层为横截面为1mm2的方形管，其内紧密插入一双层圆玻管，此双层管一端拉成尖嘴，两层尖嘴的内径分别为40及200仙m。内圆管通药物水溶液作内水相，喷出的液滴被由外圆玻管射出的油相(聚丙烯酸正丁酯一聚丙烯酸的THF／甲苯溶液)包围成油为外相的乳滴，此乳滴射入方管中的水相(80％甘油水溶液，流向同上面相反)即形成W／O／W复乳。控制各液的流速，可以得到每个油滴中仅含一个内水相液滴的复乳，其中的有机溶剂挥发后即形成分散在甘油水溶液中的载药泡囊，粒径约为70岬，大小均匀。

5、前体泡囊：

   泡囊通常分散在液体介质中，运输不便，贮藏时仍有聚集、合并和泄漏等物理稳定性问题，故研究将其制成前体泡囊(proniosomes)，临用前加介质搅拌温育即得泡囊混悬液。目前已用于包载各种水溶性和水不溶性药物。其制备工艺简单，运输、贮藏稳定性好，具有工业化生产前景。例如雌二醇前体泡囊的制备，将Span 40、胆固醇、十二烷基硫酸钠和雌二醇在氯仿／乙醇(体积比5／1)的混合溶剂中溶解，用喷雾器分次将该溶液喷入圆底烧瓶内山梨醇的表面上，每次喷入后将烧瓶装入减压旋转蒸发仪上，于65。C水浴减压旋转15 min使山梨醇近干，再喷第二次，反复操作直至溶液喷完为止。取下烧瓶置真宅保干器中过夜，即得干燥粉末状前体泡囊。将所得前体泡囊加水于80。C旋涡混合2 min，山梨醇溶解即得雌二醇泡囊混悬液。另外，亦可先制备泡囊，再将泡囊混悬液转化为前体泡囊，如在旋转蒸发仪的圆底烧瓶内盛山梨醇粉末(载体材料，水浴65～70。C)，用雌二醇(水中不溶)的泡囊混悬液少量喷洒，避免形成湿块，约20 nfin后，待山梨醇变干，再喷加少量混悬液，反复操作，最后将粉末在干燥器中进一步干燥，即得。将所得前体泡囊加水于80。C旋涡混合2 min，山梨醇溶解，即再生得雌_二醇泡囊混悬液。其泡囊粒径、体外释放、包封率等同原泡囊混悬液均无明显变化。

二亲嵌段共聚物可以用于泡囊制作的材料有：

PLGA-mPEG

PDLLA-mPEG

PLLA-mPEG

主动靶向材料：

PLGA-PEG-MAL

PLGA-PEG-NHS

PLGA-PEG-NH2

PLGA-PEG-COOH

PLGA-PEG-SH

PLGA-PEG-Folate