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Cyanine菁染料用于小鼠活体成像实验步骤和方法

时间:2016-11-04 17:33:01       浏览:2405

Cyanine菁染料用于小鼠活体成像实验步骤和方法

 

首先我们用不同的活性基团的Cyanine菁染料和相应的活性基团的生物分子或小分子药物发生反应,链接到一起。

 

Cyanine3 NHS ester和带NH2的药物分子连接

Cyanine7 maleimide和带SH的药物分子或生物分子连接

Cyanine5 amine和带NHS的药物分子或小分子连接

Cyanine5.5 azideCyanine3.5 alkyne用于连接DNAoligonucleotides


Cyanine3/5/7-药物分子或小分子多肽用于小鼠活体成像实验

实验步骤如下:

SPF BALB/C裸鼠,68 周龄, 1820, 实验前24 h 自由进食、饮水。

于实验裸鼠腹腔内注射2%戊巴比妥钠300μL(215 mg/ kg)麻醉动物。将裸鼠俯卧位平放于小动物多光谱活体成像系统的记录暗箱中。

实验时将Cy7 Cy7 标记的生物分子或药物DMSO 稀释后,于裸鼠尾静脉注射200μL( 0.5 mg/g) [最佳用量和时间需要客户根据自己的仪器和药物试剂等条件优化] ,5min 记录1张动物在体内发射荧光的成像图片,分析荧光药物的分布情况。对照鼠不注射药物,进行同时记录。记录结束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、肾等脏器,进行成像。

Cy7 检测时激发波长700770 nm 带通 ,发射波长790 nm 长通。液晶可调谐滤光片扫描范围 780950 nm ,扫描步进10 nm。曝光时间为500 ms

不同的药物代谢时间不一样,注射入裸鼠体内,荧光立即分布全身,然后逐步向膀胱聚集,呈现显著的肾排泄的特点一般4~6 小时,快得只有30 分钟;如果是骨骼等部位靶点的Cy7 标记药物,有客户反映一周后活体成像系统仍能检测到荧光成像。

器官切片观察:将解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4 小时以上,0%20%30%PBS 蔗糖依次沉底,20μm 切片,多聚赖氨酸洗过的载玻片贴片,晾干,DAPI 染色。共聚焦显微镜观察,激光器为氦氖 633 nm

 

西安瑞禧生物科技有限公司产品种类:

Cyanine3 alkyne

Cyanine3 azide

Cyanine3 carboxylic acid  1144107-76-5

Cyanine3 hydrazide

Cyanine3 maleimide

Cyanine3 NHS ester   1032678-38-8

Cyanine3.5 azide

Cyanine3.5 carboxylic acid  1144107-79-8

Cyanine3.5 NHS ester

Cyanine5 alkyne

Cyanine5 amine

Cyanine5 azide

Cyanine5 Boc-hydrazide

Cyanine5 carboxylic acid

Cyanine5 hydrazide

Cyanine5 maleimide

Cyanine5 NHS ester  1032678-42-4

Cyanine5.5 alkyne

Cyanine5.5 azide

Cyanine5.5 carboxylic acid  1144107-80-1

Cyanine5.5 maleimide

Cyanine5.5 NHS ester

Cyanine7 amine   1650635-41-8

Cyanine7 azide

Cyanine7 carboxylic acid

Cyanine7 maleimide

Cyanine7 NHS ester

Cyanine7.5 amine

Cyanine7.5 azide

Cyanine7.5 carboxylic acid   1686147-68-1

Cyanine7.5 maleimide

Cyanine7.5 NHS ester

Sulfo-Cyanine 5 NHS ester

Sulfo-Cyanine3 azide

Sulfo-Cyanine3 carboxylic acid

Sulfo-Cyanine3 maleimide

Sulfo-Cyanine3 NHS ester

Sulfo-Cyanine5 alkyne

Sulfo-Cyanine5 azide

Sulfo-Cyanine5 carboxylic acid   1121756-16-8

Sulfo-Cyanine5 maleimide

Sulfo-Cyanine7 azide

Sulfo-Cyanine7 carboxylic acid

Sulfo-Cyanine7 NHS ester

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