DOTA是一种十二元四氮杂大环配体，本质上是环楞胺中四个氮上的氢被乙酸基取代的产物. 实验选取DOTA为双功能螯合剂,采用戊二醛法将重金属铅离子分别与载体蛋白BSA和OVA偶联制备免疫原和包被原,经测定其结合比分别为13:1和9:1.用合成的免疫原免疫制备兔多克隆抗体并建立间接竞争ELISA(ic-ELISA),结果显示,其icELISA线性回归方程为y=12.014lnx-13.249(R2=0.9951),IC50和IC20分别为193.4 ng/mL和15.9 ng/mL,具有较好的检测灵敏度.交叉反应试验显示,除了与镉交叉反应率达20.4%外,该抗体与其它重金属铁,铅和锌等的交叉反应率均小于6.4%,特异性较好.本研究成功制备鉴定了重金属铅人工抗原并制备了兔多克隆抗体.灵敏度和特异性分析表明:用杂环类双功能螯合剂制备的重金属人工抗原的制备效果较好,为下一步开展该杂环类双功能螯合剂在重金属快速检测技术中的研究奠定基础.

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