产品概述

Cy5/Cy5.5/Cy7偶联试剂盒可以通过抗体/蛋白上的伯胺基团（如赖氨酸），简单、快速地实现抗体/蛋白与 Cy5/Cy5.5/Cy7的共价偶联。

此为通用型试剂盒，适合各种分子量不一致的抗体/蛋白偶联Cy5/Cy5.5/Cy7。偶联在30 分钟内即可完成，偶联效率可达70%左右。使用超滤管纯化，可快速去除多余Cy5/Cy5.5/Cy7，且不会损失抗体/蛋白。 

优点

1、操作便捷，反应快速。

2、偶联效率高，且延长反应时间不影响偶联效率。

3、此为通用型试剂盒，适合各种分子量不一致的抗体/蛋白偶联Cy5/Cy5.5/Cy7。

4、实验结果重现性好。     

偶联反应示意图

Cy5/Cy5.5/Cy7偶联试剂盒使用说明

Cy5/Cy5.5/Cy7偶联试剂盒可以通过抗体/蛋白上的伯胺基团（如赖氨酸），简单、快速地实现抗体/蛋白与Cy5/Cy5.5/Cy7的共价偶联。此为通用型试剂盒，适合各种分子量不一致的抗体/蛋白偶联Cy5/Cy5.5/Cy7。

偶联在30分钟内即可完成，偶联效率可达70%左右。使用超滤管纯化，可快速去除多余Cy5/Cy5.5/Cy7，且不会损失抗体/蛋白。    

 实验步骤

  1. 取1~10 mg抗体/蛋白溶解于1 mL纯水中，加入100 μL Coupling Reagent，混合均匀。

(以下步骤按标记1 mg抗体/蛋白为例)。

  2. 根据Cy5/Cy5.5/Cy7标记需求量，称取0.1 ~1 mg Cy5/Cy5.5/Cy7mix固体加至第1步溶液，充分混合溶解。

  注：(a) 若Cy5/Cy5.5/Cy7mix用量超出1 mg，可能导致荧光标记过量，引起荧光部分淬灭;

(b) 若低于1 mg的Cy5/Cy5.5/Cy7mix难以称取，可先取1 mg Cy5/Cy5.5/Cy7mix固体溶解于100 μL Cy5/Cy5.5/Cy7 mix溶解液，再按需取Cy5/Cy5.5/Cy7mix溶液加至第1步溶液。由于Cy5/Cy5.5/Cy7mix溶解后易分解，溶液须尽快使用且不可保存。

3. 室温避光反应30 min，延长反应时间不影响偶联效率。

4. 将反应液转移至超滤管，10000rpm超滤5 min，即可除去未反应的Cy5/Cy5.5/Cy7和无机盐成分，为提高纯度，可加入纯水重悬抗体/蛋白，重复超滤1~2次。

5. 使用纯水或PBS将超滤管截留下的抗体/蛋白重悬，即得到Cy5/Cy5.5/Cy7标记的抗体/蛋白溶液。

注意事项

1. 偶联前抗体/蛋白中可能含有成分，建议低于以下比例:

2. 偶联后的抗体/蛋白应避光保存。通常在4 ℃下可保存6~12个月。如需保存更长时间，可加入冷冻保护剂如50%甘油，在-20℃保存。    

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