CLV3是一种分泌性的多肽，在加工分泌过程中被水解为12个氨基酸组分的活性多肽。科研团队一直在寻找分子量更小的量子点作为CLV3的荧光标签，为解决这一问题，有科研学者提供了一种CLV3十二肽修饰的CdTe量子点的制备方法，采用该量子点所制备的荧光探针，瑞禧生物小编为大家分享如下：

CLV3十二肽修饰的CdTe量子点的制备方法，包括以下步骤:

(I) 、采用一锅法合成CdTe量子点；(2)、采用芴甲氧羰基固相肽合成法合成CLV3十二肽，采用反向HPLC进行纯化，纯化后制得纯度大于98%的CLV3十二肽，其氨基酸序列为NH2-RTVPSGPDPLHH-C00H ； (3)、采用零距离偶联法将CLV3十二肽连接到量子点CdTe的表面，从而制得CLV3十二肽修饰的CdTe量子点。
所述步骤(1)中，CdTe量子点的合成方法具体如下:首先将CdCl2溶液与巯基乙酸混合均匀，并在混合液中持续通入高纯氮气保持混合液冒泡状态；然后采用碱性溶液将混合液的PH调节至碱性，直至混合液变澄清后停止调节；将柠檬酸三钠和Na2TeO3溶液添加至混合液中，最后加入NaBH4,混合均匀后得到反应液，并停止通入氮气；将反应液移置反应爸中,在95-105°C的条件下反应l-2h ;反应结束后在反应液中加入过量丙酮,生成沉淀,将沉淀离心分离后收集，所得沉淀即为CdTe量子点，最后将沉淀用超纯水重悬后放置于冰箱中冷藏。
所述步骤⑵中，采用ABI433A型多肽合成仪进行合成，纯化时采用反相HPLC进行，反相HPLC包含两个溶剂输送泵，检测波长为220nm，多肽纯度用220nm紫外吸收值测定和全离子液相色谱-质谱的方法的分析。
所述的零距离偶联法的步骤如下:将碳化二亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、2-吗啉乙磺酸缓冲液以及去离子水加入到CdTe量子点溶液中，搅拌反应后制得混合物；将混合物离心除去过量的试剂，所剩余的沉淀用双蒸水洗涤后，再向沉淀中加入CLV3十二肽、双蒸水以及硼酸钠缓冲液，得到混合溶液；将混合溶液用超声波在25°C条件下温育2h，然后将混合溶液在4°C条件下储存过夜，混合溶液中过量的多肽通过离心的方法除去，即可制得CLV3十二肽修饰的CdTe量子点。

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