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瑞禧水溶性CdTe量子点625QDs-MAb修饰2F11/ER抗体/蛋白单抗
水溶性量子点(QD)作为一种新型的生物荧光探针,在免疫生物学研究中有着广阔的应用前景,今天瑞禧生物小编分析量子点荧光探针,一起看看吧:
取1 mmolL的水溶性CdTe荧光量子点100 pul,加0. 05 molL的硼酸盐缓冲液400 pul,充分混合;配制1.3 mg/50 ul EDC偶联剂,取10 ul偶联剂加入上述体系中,活化 15 min;加入单克隆抗体 Pan CK20ug,混匀;室温反应2 h后,4℃孵育过夜;次日将反应物12 000 r/ min条件下离心 20 min并去除沉淀物;取上清用透析袋透析(母液PBS缓冲液,pH7.4),4℃避光透析4 h,透析过程中每隔1 h换Ⅰ次PBS缓冲液;透析结束后,吸出透析袋内液体,置于另一清洁的eppendorf管中,4℃冰箱保存备用。
分析625QDs-MAb荧光探针直接免疫荧光检测结果。无论在低倍镜下还是在高倍镜下(HepG2细胞的胞浆内呈现均匀分布的明亮的红色荧光,胞浆和胞核界限分明,背景清晰,CK定位与免疫细胞化学染色结果一致;阴性对照未见明显荧光。表明625QD:-MAb探针能特异性识别HepG2细胞内Pan CK蛋白;与 FITC标记相比,625QDs标记的图像信号发光强度更高,更有特异性。
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