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瑞禧发射波长615nm氨基化NH2-CdSe/ZnS量子点偶联BPA半抗原
今天瑞禧生物小编分享氨基化量子点偶联抗原的过程,一起看看吧:
活性酯的制备:
取15mmolL的 BPA半抗原160uL,再加入12.3mg/mL 的NHS溶液45L,用漩涡混合器混匀后加入255uLEDC (5mg/mL),用DMF定容到1mL,放置于静音混合器上常温反应12小时以上。通过薄层层析观察活性酯的生成。投料摩尔比为BPA半抗原:NHS:EDC=1:2:3.1.标记反应:将50uLQDs(浓度为8umoVL)溶解于340uL的硼酸盐缓冲液,再加入80uL的活性酯,放置于静音混合器上常温反应12小时以上。投料摩尔比为活性酯:QDs=480:1.
标记物的纯化:
在4℃,6000r/min条件下,每次1小时。用截留量为5K的超滤离心管离心8次,每次离心前加入1.9mL的硼酸盐缓冲液(含0.02%NaNg),用含0.02%NaN,硼酸盐缓冲液做空白,通过紫外扫描观察直到BPA半抗原(276nm)无吸收峰为止。离心结束后,用QDs保存液定容到400uL,此时量子点标记物的浓度为1umolL,放入到4℃保存。
从荧光光谱图看出,量子点标记物的发射波长窄而且对称,此时标记物的z大发射波长为615nm。
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