组氨酸标签(his-tag)是蛋白纯化的首选标签。蛋白质研究和生产中多采用商品ni-次氨基三乙酸(ni-nta)凝胶作为亲和层析树脂纯化组氨酸标签蛋白。下面瑞禧生物小编整理了一种用于组氨酸标签蛋白纯化的纳米二氧化硅颗粒的制备方法。

具体步骤如下：

步骤1，将纳米二氧化硅颗粒超声分散在乙醇中，加入3-氨基丙基三乙氧基硅烷，常温搅拌，离心，得到氨基化的纳米二氧化硅颗粒；

步骤2，将氨基化的纳米二氧化硅颗粒用磷酸盐缓冲液洗涤除去未反应的3-氨基丙基三乙氧基硅烷，超声分散在磷酸盐缓冲液中，加入戊二醛溶液，常温搅拌，反应结束后，磷酸盐缓冲液洗涤，离心，得到醛基化的纳米二氧化硅颗粒；

步骤3，醛基化的纳米二氧化硅颗粒用磷酸盐缓冲液重新悬浮，加入含亚氨基二乙酸的4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸溶液，常温搅拌，用tris-hcl缓冲液洗涤和重新悬浮，加入氰基硼氢化钠溶液，常温搅拌，离心，tris-hcl缓冲液洗涤，得到用于组氨酸标签蛋白纯化的纳米二氧化硅颗粒。

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