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新型定点修饰的聚乙二醇化重组人生长激素(PEG-rhGH)修饰位点的研究方法,为该类新型修饰技术产物的质量评价提供依据.方法:采用MALDI-TOF质谱分析修饰产物中聚乙二醇(PEG)的修饰个数及修饰肽段的质量数;采用LC-Q-TOF质谱分析修饰位点,分析色谱柱为UPLC色谱柱(Protein ACQUITY BEH C;Column,150 mm×2.1 mm,1.7μm,300A),以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,进行梯度洗脱,柱温为40℃.质谱数据采集条件为MS^(E)模式,一级质谱能量4 eV,二级碎裂电压30~55 eV.结果:修饰蛋白中PEG的平均相对分子质量为30000,并且每个PEG-rhGH分子中仅存在1个PEG修饰;原型蛋白重组人生长激素中第134位精氨酸被替换为赖氨酸,且该赖氨酸的ε-氨基与连接子HOOC-O-CH_(2)-CH_(2)-N_(3)中的羧基端共价结合,连接子另一端的叠氮基团与活化后的PEG偶联后生成修饰产物.结论:联合运用多种质谱技术,通过比对人生长激素国家对照品,原型蛋白与修饰蛋白的酶切肽图谱及对特定肽段的一级,二级碎片的分子量分析,可以确定新型定点修饰的PEG-rhGH的修饰位点.
英文名:PEG-N3修饰药物
中文名:聚乙二醇-叠氮-药物
规格:PEG分子量:2000;34000;5000可选
用 途:仅供科研实验使用
纯度:95%
保存条件:-20度
保质期限:12个月
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