产品名称：pCMV-N-Flag-BioID2 ；邻近蛋白生物素标记质粒
产品特点
高效表达：该质粒含有CMV启动子，能够高效启动目的蛋白在哺乳动物细胞中的表达。
方便检测：表达的融合蛋白带有3X Flag标签，便于后续的检测和纯化。
多抗性选择：带有氨苄青霉素（Ampicillin）抗性和新霉素（Neomycin）抗性，方便转化大肠杆菌后的阳性菌筛选，以及转染哺乳动物细胞后稳定表达目的蛋白的细胞株筛选。
技术原理
pCMV-N-Flag-BioID2质粒基于邻近依赖的生物素标记鉴定（Proximity-dependent biotin identification, BioID）技术，该技术利用了来源于E.coli生物素连接酶（Biotin ligase, BirA）的R118G突变体BirA*（在BioID2中为来源于Aquifex aeolicus生物素连接酶的R40G突变体，也称为BirA*）。在ATP和生物素（Biotin）存在的条件下，BioID2融合蛋白能够对其邻近的（10nm或35nm半径内，取决于是否表达linker）任意暴露在外的蛋白赖氨酸残基进行生物素标记。
优点与应用
优点：
适用范围广：适用于大部分细胞，能够标记直接相互作用的蛋白以及一定范围内相邻近的蛋白。
敏感性高：能够有效识别体内蛋白与蛋白之间微弱、短暂的相互作用。
克服溶解度难题：特别适合研究在酵母双杂交中可溶性差或较难纯化的蛋白。
标记的蛋白易纯化、背景低：蛋白经BioID2标记生物素后与Streptavidin磁珠或凝胶结合紧密，可用强去垢剂洗涤，消除非特异性结合蛋白，降低背景。
更灵活的生物素标记半径：通过选择不同的酶切位点，可调节BioID2和诱饵蛋白之间是否表达linker，从而控制邻近蛋白生物素标记的半径。
更好的生物素标记效果：BioID2分子量较小，对融合蛋白功能的影响更小，空间位阻也更小，更容易接近被标记蛋白并产生更好的标记效果。
更低的生物素浓度：相比BioID，BioID2在更低的生物素浓度下即可有效标记相互作用的蛋白。
更宽的反应温度范围：BioID2在37℃-55℃都具有良好的生物素标记活性。
应用：
在筛选和鉴定生物体内的蛋白与蛋白相互作用方面发挥重要作用。
探索相关蛋白的功能。
适用于空间和时间上细胞的动态过程的研究，以及提供动力学数据。
产地：西安
规格：1mg 5mg 10mg
纯度：99%
状态：固体/粉末/溶液
温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh
瑞禧生物科技有限公司提供生物素相关的基础及定制产品，如生物素标记化合物、含生物素的小分子、生物素化高分子纳米粒子、小分子药物长链生物素化探针等，欢迎咨询。


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