FITC-Biotin，Fluorescein Isothiocyanate-Biotin，荧光素标记生物素资料分享

FITC-BIOTIN（荧光素标记生物素）

FITC-BIOTIN 是由异硫氰酸荧光素（FITC）和生物素通过共价键连接而成的荧光探针。该分子保留了生物素对亲和素/链霉亲和素的高亲和力，同时具有 FITC 的典型荧光特性（激发波长约495 nm，发射约519 nm）。FITC-BIOTIN 常用于免疫荧光、细胞成像、亲和标记、ELISA 检测及微阵列技术中。其结构稳定，水溶性良好，既具靶向识别能力又具荧光示踪功能，是分子探针和纳米载体修饰的优选标记分子。

一、简介

名称：FITC-Biotin

中文名称：荧光素标记生物素

英文别名：Fluorescein-Biotin，Fluorescein Isothiocyanate-Biotin，Biotin-FITC

化学式：C₂₀H₂₇N₅O₄S（典型结构）

分子量：约 449.5 g/mol（视结构而略有变化）

结构特征：由荧光素异硫氰酸酯（FITC）与生物素分子通过共价方式偶联而成，具有双重功能：荧光标记与生物素-亲和素识别能力。

二、分子结构与组成

FITC-Biotin 是一种将荧光素（Fluorescein）与生物素（Biotin）通过稳定的共价键连接的分子探针。典型结构为 FITC 通过其异硫氰酸基团（–N=C=S）与 Biotin 上的氨基反应，生成稳定的硫脲键。

FITC（Fluorescein isothiocyanate）：一种绿色荧光染料，广泛用于标记蛋白质、抗体、核酸等，具有良好的光稳定性。

Biotin：天然维生素B7，能够与亲和素（Avidin）或链霉亲和素（Streptavidin）结合，亲和力*强（Kd ~10⁻¹⁵ M）。

三、物化性质

四、优势与特征

1. 双重功能性：同时具备荧光检测与生物素化亲和功能；

2. 高灵敏度：FITC强荧光信号可实现微量检测；

3. 高特异性：Biotin 可与 Streptavidin/NeutrAvidin 形成稳定结合，广泛用于拉下实验、免疫荧光、示踪等；

4. 多用途兼容性：可用于生物素亲和系统中与其他 Biotin 标记或结合蛋白共同使用；

5. 小分子量：不会显著影响靶标的生物活性或空间结构。

五、应用领域

1. 免疫荧光染色（IF）

FITC-Biotin 可结合到链霉亲和素（Streptavidin）标记的抗体或蛋白上，实现靶标的荧光成像。

2. 细胞标记与追踪

可用于活细胞或固定细胞的表面标记，通过荧光显微镜观察细胞功能或位置变化。

3. 荧光拉下实验（Pull-down）

利用Biotin-Streptavidin系统进行靶分子的亲和富集，FITC荧光信号可用于追踪或验证结合情况。

4. 核酸杂交

在原位杂交实验中，将 FITC-Biotin 探针用于标记 DNA 或 RNA 探针，实现高灵敏度的目标片段检测。

5. 荧光传感器开发

作为构建荧光传感平台的功能性小分子，用于制备蛋白阵列、微球或微阵列芯片。

六、参考文献应用实例

1. Zhou et al., *Analytical Chemistry*, 2018

   > 利用FITC-Biotin结合链霉亲和素-磁珠系统，实现miRNA的特异富集与荧光定量检测。

2. Lee et al., *Biosensors & Bioelectronics*, 2021

   > 开发生物素-荧光标记纳米探针，实现癌细胞表面标志物的快速检测与成像。

3. Yamada et al., *Journal of Neurobiology*, 2002

   > 使用FITC-Biotin示踪神经元路径，结合链霉亲和素增强信号，实现高分辨率神经成像。

七、使用方法建议

制备溶液：推荐使用无水DMSO或DMF配制母液（1–10 mM），分装避光储存；

结合反应：

  可用于标记含氨基生物分子，如蛋白质、抗体；

  或通过亲和素中介与其他生物素化物形成多聚体；

操作注意事项：

  避免强光直射，实验操作中使用黄光；

  使用后密封冷冻保存，防止光降解；

  实验前进行结合活性验证（可用链霉亲和素-FITC标准比较信号强度）。

八、结语

FITC-Biotin 作为一种小分子荧光探针，结合了高亲和生物素识别系统与强荧光发射能力，广泛用于生命科学、药物研究、分子诊断及纳米技术等多个领域。其优良的多功能性与灵活的结合方式使其成为构建高灵敏度检测平台与靶向标记系统的理想选择。

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