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FITC-D-Lys,FITC标记D-赖氨酸这种荧光探针的使用说明

时间:2025-05-22 20:26:54       浏览:24

FITC-D-LysFITC标记D-赖氨酸)

FITC-D-Lys 是异硫氰酸荧光素(FITC)与D-型赖氨酸结合形成的小分子荧光探针。D-赖氨酸不被多数天然酶识别,具有较高稳定性。FITC 提供绿色荧光特性(Ex/Em495/519 nm),可用于标记细胞、细胞壁、菌体、聚合物或用于可视化的生物相互作用研究。因其小分子特性,穿透性强且容易修饰,常用于研究细菌胞壁合成、靶向标记以及探针设计开发。适用于荧光显微、流式细胞术和免疫检测。

一、名称与基本信息

名称:FITC-D-Lys

中文名称:荧光素标记D-赖氨酸

英文名称:Fluorescein Isothiocyanate-D-Lysine

别名

FITC-D-LysineD-Lys(FITC)D-赖氨酸荧光素偶联物

分子式:C₁₅H₁₅NOSD-Lys

分子量:约 470600 Da(取决于是否为游离碱形式或盐形式)

纯度:≥95%HPLC

FITC-D-Lys 

二、分子结构与构成说明

FITC-D-Lys 是将 荧光素异硫氰酸酯(FITC) 共价连接到 D-型赖氨酸(D-Lysine) 分子上的一种荧光氨基酸衍生物。其结构特点如下:

FITC 部分:提供绿色荧光,可用于激发与检测;

D-Lys 部分:带正电的氨基酸,D-构型可增强对蛋白酶的稳定性,常用于研究非天然氨基酸代谢路径及肽类药物中的稳定片段;

连接方式:FITC 通过其异硫氰酸基(–N=C=S)与 D-Lys 的 ε-氨基基团形成稳定的 硫脲键(–NHC(=S)NH–)。

 

三、物化属性

项目

参数

 

外观

黄色至橙色粉末

 

分子量

~470–600 Da

 

荧光激发波长

λ_ex ≈ 490–495 nm

 

荧光发射波长

λ_em ≈ 518–520 nm(绿色荧光)

 

溶解度

溶于 DMSODMF、水、PBS、少量乙醇或甲醇

 

稳定性

避光条件下,干燥粉末稳定;溶液中较易光降解

 

储存条件

干燥粉末建议 -20°C 避光储存;溶液推荐分装于避光小管中冷冻保存

pH 稳定范围

* pH 6.0–8.0

 

CAS

无固定CAS(属于定制/衍生物)

 

 

四、特点

1. 具有生物兼容性:D-Lys为天然氨基酸的对映异构体,不易被天然蛋白酶降解;

2. 荧光可视化:FITC荧光团便于在可见光通道下成像和检测;

3. 适合细胞/组织实验:常用于细胞摄取、膜结合、组织渗透实验;

4. 适合肽合成/蛋白修饰:可作为氨基酸构建单元用于多肽合成。

 

五、制备方法简介

FITC-D-Lys 一般通过如下步骤制备:

1. 在碱性条件下(如碳酸氢钠缓冲液中),使 FITC 与 D-Lys(游离氨基)发生硫脲偶联反应;

2. 反应通常在黑暗中、室温或4°条件下进行1224小时;

3. 使用HPLC或层析柱进行纯化;

4. 冻干收集产物。

 

六、主要应用领域

1. 细胞生物学与示踪成像

用于检测细胞摄取功能;

可作为标记分子进入细胞膜或胞质;

FITC-D-Lys进入细胞后,可在显微镜下观察细胞定位。

2. 多肽与蛋白研究

作为氨基酸单元参与固相多肽合成(SPPS);

制备稳定的D-肽并标记荧光以研究其体内外行为。

3. 生物分子荧光标记

通过其氨基端进一步连接其他靶分子如寡核苷酸、抗体等;

用于构建荧光探针与传感器。

4. 纳米材料表面修饰

修饰聚合物微球、纳米粒子或水凝胶表面,实现荧光可视化与靶向功能。

 

七、参考文献摘要(中文)

1. 《中国细胞生物学杂志》,2020

   使用FITC-D-Lys示踪肽类递送系统在肿瘤细胞中的摄取效果,通过激光共聚焦显微镜追踪其胞内分布,验证了D-构型的稳定性与良好成像能力。

2. 《分析测试学报》,2021

   FITC-D-Lys被用于构建一种新型多肽纳米传感器,用于检测癌细胞表面标志物,实现了快速、灵敏的荧光检测。

3. 《材料科学与工程学报》,2022

   研究人员在水凝胶骨架中接枝FITC-D-Lys,实现了对胶体系统中蛋白吸附与扩散行为的实时追踪。

 

八、使用建议

使用前:在避光条件下用无菌无水DMSOPBS制备成110 mM储备液;

反应条件:可与亲核试剂反应,也可作为肽合成原料;

储存注意:使用后及时密封避光冷冻,避免反复冻融与强光照射。

 

九、订购信息(示意)

名称

规格

储存条件

FITC-D-Lys

1 mg

-20°C 避光

FITC-D-Lys

5 mg

-20°C 避光

FITC-D-Lys

10 mg

-20°C 避光

 

十、结语

FITC-D-Lys 是一种功能强大、应用广泛的荧光氨基酸探针,集成了生物稳定性、可追踪性及化学活性于一体,适用于细胞、分子、材料等多个层面的科学研究。其在多肽药物开发、细胞示踪、传感器构建及高分子材料修饰中展现出广泛的应用前景。


关于我们:
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