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FITC-D-Lys(FITC标记D-赖氨酸)
FITC-D-Lys 是异硫氰酸荧光素(FITC)与D-型赖氨酸结合形成的小分子荧光探针。D-赖氨酸不被多数天然酶识别,具有较高稳定性。FITC 提供绿色荧光特性(Ex/Em:495/519 nm),可用于标记细胞、细胞壁、菌体、聚合物或用于可视化的生物相互作用研究。因其小分子特性,穿透性强且容易修饰,常用于研究细菌胞壁合成、靶向标记以及探针设计开发。适用于荧光显微、流式细胞术和免疫检测。
一、名称与基本信息
名称:FITC-D-Lys
中文名称:荧光素标记D-赖氨酸
英文名称:Fluorescein Isothiocyanate-D-Lysine
别名
:FITC-D-Lysine、D-Lys(FITC)、D-赖氨酸荧光素偶联物
分子式:C₁₅H₁₅NO₅S–D-Lys
分子量:约 470–600 Da(取决于是否为游离碱形式或盐形式)
纯度:≥95%(HPLC)
二、分子结构与构成说明
FITC-D-Lys 是将 荧光素异硫氰酸酯(FITC) 共价连接到 D-型赖氨酸(D-Lysine) 分子上的一种荧光氨基酸衍生物。其结构特点如下:
FITC 部分:提供绿色荧光,可用于激发与检测;
D-Lys 部分:带正电的氨基酸,D-构型可增强对蛋白酶的稳定性,常用于研究非天然氨基酸代谢路径及肽类药物中的稳定片段;
连接方式:FITC 通过其异硫氰酸基(–N=C=S)与 D-Lys 的 ε-氨基基团形成稳定的 硫脲键(–NH–C(=S)–NH–)。
三、物化属性
项目 | 参数 | |
外观 | 黄色至橙色粉末 | |
分子量 | ~470–600 Da | |
荧光激发波长 | λ_ex ≈ 490–495 nm | |
荧光发射波长 | λ_em ≈ 518–520 nm(绿色荧光) | |
溶解度 | 溶于 DMSO、DMF、水、PBS、少量乙醇或甲醇 | |
稳定性 | 避光条件下,干燥粉末稳定;溶液中较易光降解 | |
储存条件 | 干燥粉末建议 -20°C 避光储存;溶液推荐分装于避光小管中冷冻保存 | |
pH 稳定范围 | *佳 pH 6.0–8.0 | |
CAS号 | 无固定CAS(属于定制/衍生物) |
四、特点
1. 具有生物兼容性:D-Lys为天然氨基酸的对映异构体,不易被天然蛋白酶降解;
2. 荧光可视化:FITC荧光团便于在可见光通道下成像和检测;
3. 适合细胞/组织实验:常用于细胞摄取、膜结合、组织渗透实验;
4. 适合肽合成/蛋白修饰:可作为氨基酸构建单元用于多肽合成。
五、制备方法简介
FITC-D-Lys 一般通过如下步骤制备:
1. 在碱性条件下(如碳酸氢钠缓冲液中),使 FITC 与 D-Lys(游离氨基)发生硫脲偶联反应;
2. 反应通常在黑暗中、室温或4°C 条件下进行12–24小时;
3. 使用HPLC或层析柱进行纯化;
4. 冻干收集产物。
六、主要应用领域
1. 细胞生物学与示踪成像
用于检测细胞摄取功能;
可作为标记分子进入细胞膜或胞质;
FITC-D-Lys进入细胞后,可在显微镜下观察细胞定位。
2. 多肽与蛋白研究
作为氨基酸单元参与固相多肽合成(SPPS);
制备稳定的D-肽并标记荧光以研究其体内外行为。
3. 生物分子荧光标记
通过其氨基端进一步连接其他靶分子如寡核苷酸、抗体等;
用于构建荧光探针与传感器。
4. 纳米材料表面修饰
修饰聚合物微球、纳米粒子或水凝胶表面,实现荧光可视化与靶向功能。
七、参考文献摘要(中文)
1. 《中国细胞生物学杂志》,2020
使用FITC-D-Lys示踪肽类递送系统在肿瘤细胞中的摄取效果,通过激光共聚焦显微镜追踪其胞内分布,验证了D-构型的稳定性与良好成像能力。
2. 《分析测试学报》,2021
FITC-D-Lys被用于构建一种新型多肽纳米传感器,用于检测癌细胞表面标志物,实现了快速、灵敏的荧光检测。
3. 《材料科学与工程学报》,2022
研究人员在水凝胶骨架中接枝FITC-D-Lys,实现了对胶体系统中蛋白吸附与扩散行为的实时追踪。
八、使用建议
使用前:在避光条件下用无菌无水DMSO或PBS制备成1–10 mM储备液;
反应条件:可与亲核试剂反应,也可作为肽合成原料;
储存注意:使用后及时密封避光冷冻,避免反复冻融与强光照射。
九、订购信息(示意)
名称 | 规格 | 储存条件 |
FITC-D-Lys | 1 mg | -20°C 避光 |
FITC-D-Lys | 5 mg | -20°C 避光 |
FITC-D-Lys | 10 mg | -20°C 避光 |
十、结语
FITC-D-Lys 是一种功能强大、应用广泛的荧光氨基酸探针,集成了生物稳定性、可追踪性及化学活性于一体,适用于细胞、分子、材料等多个层面的科学研究。其在多肽药物开发、细胞示踪、传感器构建及高分子材料修饰中展现出广泛的应用前景。
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