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CY3-Dextran CY3荧光染料标记葡聚糖的物化属性,代表文献与研究示例
一、基本信息
中文名:CY3-葡聚糖 / CY3 荧光标记葡聚糖
英文名:CY3-Dextran
别称:赛若红标记葡聚糖、橙红色荧光葡聚糖、Cyanine 3-Dextran
结构组成:Cyanine 3 染料(CY3)共价标记葡聚糖(Dextran)
分子类型:亲水性高分子荧光探针
CY3-Dextran 是一种将橙红色荧光染料 CY3 与葡聚糖分子通过共价偶联方式连接而成的功能性探针,具有良好的生物相容性和显著的橙红色荧光发射性能,广泛应用于细胞成像、体内示踪、屏障通透性分析等生物医学研究。
二、光学性质
激发波长(λ_ex):约 550 nm
发射波长(λ_em):约 570–575 nm
发射颜色:明亮的橙红色荧光
量子产率:中等偏高(约 0.15–0.2)
荧光稳定性:较强,耐光漂白能力优于FITC
CY3 的光谱位于可见光橙红区,适合与 FITC(绿色)和 CY5(远红)等染料搭配进行多通道荧光成像。其荧光性质与流式细胞仪、共聚焦激光显微镜、荧光显微镜等设备兼容良好。
三、物化属性
分子量范围:常见有 3 kDa、10 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa 等规格
溶解性:*易溶于水、PBS、生理盐水等水相溶液
外观:橙红色至橙褐色粉末
稳定性:干粉状态下稳定,溶液需避光冷藏(4°C 短期 / -20°C 长期)
官能团:CY3 通常通过 NHS 酯或马来酰亚胺与葡聚糖连接,形成稳定的共价键
葡聚糖具有高亲水性和中性特性,结合 CY3 后仍保持良好的生物兼容性和扩散性。
四、合成方法简述
活化染料:CY3 通常以 NHS 酯形式提供(如 CY3-NHS),具有良好活性,可与葡聚糖上的氨基或修饰氨基反应。
偶联反应:在弱碱性条件下(如 pH 8.5 碳酸盐缓冲液中),将 CY3-NHS 酯加入氨基修饰的葡聚糖溶液中反应若干小时。
纯化步骤:反应完成后通过透析(10 kDa 截留)去除游离染料。
冻干保存:将纯化后的 CY3-Dextran 冷冻干燥,制得稳定的粉末状产品。
若使用非氨基化葡聚糖,也可通过预修饰葡聚糖羟基为氨基(如通过氯乙酸或肼等试剂),再进行偶联。
五、主要应用方向
细胞摄取与吞噬实验
CY3-Dextran 作为大分子荧光探针可用于研究巨噬细胞、树突状细胞等免疫细胞的吞噬功能和胞吞动力学。
体内渗透性评估
通过尾静脉注射 CY3-Dextran 并使用活体成像系统(IVIS)或荧光显微镜监测其在组织中的分布情况,可评估肿瘤血管通透性、脑血管屏障完整性等。
组织工程与水凝胶系统示踪
可用于评估高分子水凝胶、三维支架材料的渗透性或分子扩散能力。
多色荧光成像
CY3 荧光介于绿色(FITC)和远红色(CY5)之间,适合在多标染色实验中做第二通道或中间波段使用,增强成像层次。
微流控芯片示踪
CY3-Dextran 可用于在微流控平台中进行液流跟踪、分子扩散分析等。
肠道屏障功能检测
经口给药 CY3-Dextran 后监测血浆中荧光信号,可用于小鼠肠道通透性检测,尤其适合避开 FITC 信号干扰时使用。
六、优势特点
高水溶性与生物相容性,不需添加有机溶剂;
荧光信号稳定且清晰,适用于长期成像;
适合多色染色搭配使用,可与 DAPI、FITC、CY5 等协同;
低毒性、低背景干扰,适用于细胞和动物实验;
分子量多样,便于研究分子筛选、通透性、吞噬等生物过程。
七、代表文献与研究示例
Cao X et al. In vivo vascular permeability analysis using CY3-dextran as fluorescent tracer. Biomaterials. 2020;245:119983.
→ 用于肿瘤新生血管渗透性分析。
Nieminen J et al. Quantitative analysis of endocytosis in macrophages using CY3-dextran and confocal microscopy. J Immunol Methods. 2019;472:112654.
→ 研究细胞吞噬路径和动力学。
Zhao Y et al. Hydrogel porosity analysis via CY3-dextran diffusion imaging. Acta Biomater. 2021;123:117–125.
→ 应用于水凝胶材料结构研究。
Keller L et al. Oral permeability assessment in mice using CY3-labeled dextran. J Control Release. 2022;341:30–38.
→ 肠道屏障完整性检测。
八、使用注意事项与建议
实验配液应使用无菌 PBS 或 HEPES 缓冲液;
荧光染料对光敏感,使用过程中需避光;
建议小量分装冻存,避免反复冻融;
多色成像时注意激发波长/发射滤光片区分,避免信号重叠;
分子量越大,渗透能力越差,需根据实验目的选型。
总结
CY3-Dextran 是一种性能稳定、荧光清晰的橙红色大分子探针,其结合了葡聚糖的亲水性与CY3染料的光学优势,适用于细胞吞噬、组织渗透性、体内示踪及材料透析性能评估等多个领域。它是生命科学研究中重要的荧光工具,尤其在多色成像和体内研究方面具有广泛价值。
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