结构组成

5-羧基荧光素-二苯并环辛炔是一种双功能分子，结构中包含两个关键功能域：

1. 5-羧基荧光素（5-carboxyfluorescein，5-FAM）

   • 是荧光素的羧酸衍生物，具有强烈的绿色荧光，激发波长约为495 nm，发射波长约为520 nm。

   • 常用于核酸、蛋白质等的荧光标记。

2. DBCO（二苯并环辛炔）

   • 是一种应变促反应的环炔类结构，具有高反应活性，能与叠氮（azide）基团在无铜条件下进行快速、选择性的生物正交点击反应（SPAAC）。

   • 与叠氮基反应无需催化剂，适用于细胞内标记或体内成像。

英文名 5-Fam dbco

CAS号 1384485-04-4

分子量 634.6

分子式 C39H26N2O7

合成路线简述

合成该化合物的思路通常如下：

1. 5-羧基荧光素的活化：将其羧基活化为 NHS 酯或 CDI 中间体；

2. DBCO 胺的引入：使用含伯胺的 DBCO 衍生物，如 DBCO-NH₂ 与活化荧光素反应；

3. 后处理与纯化：反应产物经HPLC或硅胶柱纯化，得到高纯度的5-FAM-DBCO。

主要应用领域

1. 生物正交标记

5-羧基荧光素-DBCO 能快速与叠氮修饰的分子发生 SPAAC（应变促点击反应），广泛用于：

• DNA/RNA标记：叠氮修饰的核酸探针可通过此试剂实现可视化；

• 蛋白质标记：如通过Azidohomoalanine（AHA）代谢标记蛋白后使用FAM-DBCO荧光标记；

• 活细胞标记成像：由于不需金属催化，DBCO可以直接用于细胞中点击反应，结合FAM荧光实现绿色成像。

2. 荧光成像

由于其荧光特性与FITC相似，5-FAM-DBCO可用于绿色荧光通道检测，适用于：

• 激光共聚焦显微镜（CLSM）

• 流式细胞术（FACS）

• 荧光微阵列检测

3. 材料与表面修饰

在纳米材料、聚合物或其他表面修饰中，如果目标材料表面有叠氮基团，则可以通过该化合物实现荧光功能化。

4. 高通量筛选和信号放大系统

结合点击化学的快速、可控特性，可用于构建多价探针、生物芯片或放大检测系统中的荧光标记元件。

1384485-04-4，5-羧基荧光素-二苯并环辛炔 
1964503-36-3，NH-BIS(二聚乙二醇-叔丁酯) 
Methyltetrazine-NHS ester，1644644-96-1 
2055041-59-1，氨基-双(四聚乙二醇-羧酸) 盐酸盐 
174137-97-4，NO-二叔丁酯  NO-(COOt-Bu)2
NH-BIS(二聚乙二醇-羧酸) 盐酸盐
1060652-57-4，BG GLA NHS ester
850180-76-6，3-叠氮丙酸N-琥珀酰亚胺酯 
685082-61-5，Alkyne choline，炔胆碱 
AMCA-OSu，113721-87-2 
D-85大孔丙酸烯系弱酸性阳离子交换树脂