CY3.5-PEG-NHS是一种将荧光染料Cy3.5通过聚乙二醇（PEG）链连接，并在末端引入N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS）活性基团的功能性分子，常用于高效生物偶联反应。其纯化与表征过程对保证产品的纯度和功能性至关重要。

1. 纯化方法

合成后产物通常含有未反应的Cy3.5染料、PEG链和其他小分子杂质。纯化常采用以下手段：

凝胶渗透色谱（GPC）：利用分子量差异，分离PEG结合的标记产物与低分子杂质，获得较高纯度。

高效液相色谱（HPLC）：尤其是反相HPLC，通过性差异有效分离不同反应组分，适合对荧光标签进行精确纯化。

透析：用适当分子量截断的膜除去小分子杂质，适合中大型PEG标记物。

2. 结构与纯度表征

核磁共振（NMR）：^1H NMR和^13C NMR可确认PEG链及NHS酯结构的完整性，观察特征峰的出现与化学位移变化。

质谱（MALDI-TOF, ESI-MS）：检测分子量，验证PEG链与Cy3.5的连接是否成功及分子均一性。

紫外-可见光谱（UV-Vis）和荧光光谱：确认Cy3.5的吸收峰（约550 nm）和荧光峰（约570 nm），评估光学性质。

傅里叶变换红外光谱（FTIR）：识别NHS酯特征峰，验证活性基团存在。

3. 稳定性与储存

纯化后的CY3.5-PEG-NHS需在低温、避光条件下储存，防止NHS酯水解。通常采用干燥剂密封保存，避免湿气侵入。

状态：固体/粉末/溶液

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