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“558/568”指的是该染料的激发峰约在558 nm,发射峰约在568 nm,属于橙红色荧光区域。羧基(–COOH)官能团为其后续与生物分子偶联提供了方便的化学反应位点,尤其适用于与含氨基的蛋白质、肽链等分子形成酰胺键。
结构与性质
分子结构
BODIPY核心结构是由吡咯单元通过硼原子配位形成刚性共轭体系,增强了其荧光强度和稳定性。558/568型BODIPY在核心结构中引入了取代基,调节其光学吸收和发射波长,定位于橙红区域。
羧基侧链连接于染料分子上,为其提供了可与生物分子偶联的活性位点。
物理性质
外观:通常为深红色或橙红色固体粉末。
溶解性:易溶于有机溶剂(如DMSO、DMF、乙醇、甲醇等),在水中溶解度有限,但可通过亲水性修饰改善。
稳定性:BODIPY染料极具光稳定性,化学结构稳定,适合长期保存。
化学活性与偶联应用
羧基是BODIPY 558/568 carboxylic acid最重要的活性功能团,通过与含氨基的生物大分子(蛋白质、抗体、肽链、寡核苷酸等)发生酰胺化反应,实现稳定共价连接。偶联方法包括:
活化羧基
通常通过使用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)将羧基转化为活性NHS酯,提高与氨基的偶联效率。
酰胺键形成
在缓冲液(pH 7.4-8.5)条件下,活化的BODIPY羧基与蛋白质或肽中的赖氨酸氨基反应,生成稳定的酰胺键,实现标记。
其他偶联策略
还可用于偶联到修饰有胺基的核酸、聚合物及纳米材料上,拓展应用领域。
应用领域
生物分子标记
BODIPY 558/568 carboxylic acid常用于标记抗体、蛋白质及肽链,实现分子的荧光定位与追踪。其明亮的橙红色荧光在多色成像中表现优异,易与其他颜色荧光染料组合使用。
细胞成像
在活细胞和固定细胞成像中,BODIPY 558/568提供清晰、高对比度的荧光信号,应用于细胞器标记、蛋白定位及细胞动态监测。
荧光传感器开发
该染料的光学稳定性和优异的荧光性质,使其成为设计酶活性、pH、离子浓度等生物传感器的理想荧光报告基团。
分子探针与药物递送
通过与靶向分子偶联,可制备靶向荧光探针,用于疾病诊断和药物监测。
材料科学
BODIPY染料可修饰到聚合物和纳米载体中,应用于光电器件和光学材料。
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