CY3-SBA，CY3标记大豆凝集素的合成步骤概述
CY3-SBA是通过将花菁染料Cyanine 3（CY3）共价标记于大豆凝集素（Soybean Agglutinin, SBA）分子上的荧光探针。SBA是一种糖结合蛋白，具有特异性识别糖类结构的能力，在细胞识别和生物传感中应用。
合成步骤概述：
材料准备
取高纯度SBA蛋白，溶解于缓冲液（通常pH 7.4的磷酸盐缓冲液PBS），浓度控制在1-5 mg/mL，确保蛋白结构稳定。
活化染料准备
选用CY3-NHS酯作为标记试剂，将其溶解于无水有机溶剂（如DMSO），防止水解。
偶联反应
在避光条件下，缓慢将CY3-NHS酯加入SBA溶液中，维持体系pH约8.0-8.5以促进氨基的亲核攻击。反应在室温下轻柔搅拌2-4小时，确保标记反应充分。
反应机理
CY3-NHS酯与SBA蛋白中的赖氨酸残基氨基形成稳定的酰胺键，实现共价结合，赋予SBA荧光特性。
反应终止
反应完成后，添加胺类缓冲剂（如甘氨酸）中和未反应的活性酯，终止反应。
纯化步骤
采用透析或凝胶过滤色谱除去游离的CY3染料和小分子杂质，获得纯净的CY3-SBA复合物。
产品鉴定
通过紫外-可见光谱测定标记效率，结合SDS-PAGE和荧光扫描确认标记蛋白的完整性与纯度。
储存条件
纯化后的CY3-SBA分装保存于低温避光环境，保证荧光稳定及蛋白活性。
产品名称：CY3-SBA，CY3标记大豆凝集素
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc