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CY3-Eledoisin,CY3标记环状神经肽的化学反应原理

时间:2025-07-29 10:44:47       浏览:12
CY3-Eledoisin,CY3标记环状神经肽的化学反应原理
Eledoisin是一种源自海鞘的环状神经肽,具有特定的生物活性。Cy3-Eledoisin是通过将荧光染料Cy3共价偶联于Eledoisin肽分子上的标记产物,用于生物标记和细胞成像。
化学反应原理详述:
标记基础与反应位点
Eledoisin肽含有多个具有反应活性的氨基酸残基,如赖氨酸(Lys)上的氨基、半胱氨酸(Cys)上的巯基等,为Cy3标记提供了共价结合位点。
Cy3染料通常以NHS酯或maleimide活性基团存在,分别针对氨基或巯基官能团进行反应。
酰胺化反应机理
当Cy3-NHS酯与Eledoisin中的自由氨基接触时,氨基的孤对电子对NHS酯碳酰碳发生亲核攻击,N-羟基琥珀酰亚胺离子离去,形成稳定的酰胺键。此反应高效、特异且温和,避免肽链断裂。
巯基偶联反应
若肽链含有可反应的巯基,Cy3-maleimide通过Michael加成与巯基形成稳定的硫醚键。该反应在中性偏碱性条件下快速发生,连接牢固。
反应条件控制
反应一般在pH 7.0-8.5的缓冲液中进行,温度保持在室温或4°C以保护肽结构完整。溶剂常为PBS缓冲液或含有少量有机溶剂的体系,确保反应物溶解性。
多点标记与选择性
肽链上的多个标记位点允许多重标记,但也需控制染料与肽的摩尔比,避免过度标记导致结构和功能改变。适当调控实现理想的标记密度和荧光强度。
产物纯化与稳定性
标记反应后通常通过凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)进行纯化,去除未反应染料及副产物。产物具有优良的化学和光学稳定性,适合长期储存和应用。
产品名称:CY3-Eledoisin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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