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CY3-EODN的合成步骤概述

时间:2025-07-29 10:45:47       浏览:95
CY3-EODN的合成步骤概述
Cy3标记的EODN(假设EODN为特定的寡核苷酸或核酸类似物)是一种将荧光染料Cy3共价结合到EODN分子上的功能性标记物,应用于分子生物学、荧光成像及核酸探针研究。其合成步骤主要围绕Cy3染料的活性基团与EODN分子上可修饰位点的共价偶联展开。
合成步骤概述:
材料准备
EODN通常预先合成并含有特定的修饰基团,如5’或3’端带有氨基修饰(NH2),便于后续与Cy3-NHS酯反应。
Cy3染料多以活性NHS酯(Cy3-NHS)形式提供,具备高反应活性。
反应条件设定
反应体系多采用碳酸盐缓冲液(pH 8.0-8.5)或磷酸盐缓冲液,保证氨基的亲核活性并减少染料水解。
溶剂可为水溶液,通常掺杂少量有机溶剂如DMSO以提高Cy3-NHS的溶解度。
偶联反应
将EODN溶液与Cy3-NHS按一定摩尔比混合,通常Cy3-NHS过量以推动反应。
反应在室温或4°C条件下进行,时间约为1-4小时,确保充分反应。
Cy3-NHS酯的羧基碳与EODN端的氨基发生亲核攻击,形成稳定的酰胺键。
反应终止与纯化
反应结束后,加入胺类物质(如Tris缓冲液)终止未反应的NHS酯。
采用透析、凝胶过滤色谱或高效液相色谱(HPLC)纯化标记产物,去除游离染料和副产物。
产品名称:CY3-EODN
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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