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CY3标记的刀豆蛋白A CY3-Concanavalin-A的合成步骤
CY3标记的刀豆蛋白A(Cy3-ConA)是一种将植物凝集素——刀豆球蛋白A(Concanavalin A, 简称ConA)与荧光染料CY3通过共价键连接而制得的荧光生物探针,应用于糖蛋白识别、细胞膜糖链成分分析及生物成像等研究中。ConA是一种来源于刀豆(Canavalia ensiformis)的四聚体植物凝集素,具有高度选择性地结合α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基的能力,可用于识别和结合多种糖缀合物或糖蛋白。
CY3是一种荧光性能优良的花青类染料,其激发与发射波长分别约为550 nm和570 nm,具有较高的量子产率和光稳定性,适合用于荧光显微镜、流式细胞仪和共聚焦成像系统。为了实现CY3与ConA的有效标记,通常采用NHS酯活化的CY3染料与ConA分子中的游离赖氨酸残基发生共价酰胺化反应。
Cy3-ConA的制备过程包括以下几个主要步骤。首先,将纯化后的ConA溶解于适宜的缓冲体系中(如0.1 M碳酸氢钠缓冲液,pH 8.3),以保证赖氨酸侧链氨基处于游离态,有利于后续反应。接着,向ConA溶液中缓慢加入CY3-NHS酯溶液(通常以DMSO为溶剂),在避光条件下于室温反应1–2小时。反应完成后,通过凝胶过滤柱(如Sephadex G-25)或透析去除未反应的游离染料,获得CY3标记的ConA蛋白。
在纯化过程中,可根据蛋白与染料的摩尔比控制标记密度,避免因过度标记造成ConA生物活性的下降。终产物可用紫外-可见分光光度法测定其蛋白浓度与标记率,典型的标记度控制在每个ConA分子约结合1~3个CY3分子,以保持良好的结合能力与荧光性能。
制备后的Cy3-ConA可长期低温避光保存,一般在含甘油的缓冲液中分装保存于–20°C条件下。该探针可在细胞糖链研究、荧光标记纳米材料、糖蛋白定量分析等实验中提供双重功能,一方面识别特定糖结构,另一方面通过荧光信号实现可视化追踪。整体来看,Cy3-ConA在糖生物学与生物分析等研究方向中具有重要的应用价值。
产品名称:CY3标记的刀豆蛋白A CY3-Concanavalin-A
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
CY3标记的刀豆蛋白A(Cy3-ConA)是一种将植物凝集素——刀豆球蛋白A(Concanavalin A, 简称ConA)与荧光染料CY3通过共价键连接而制得的荧光生物探针,应用于糖蛋白识别、细胞膜糖链成分分析及生物成像等研究中。ConA是一种来源于刀豆(Canavalia ensiformis)的四聚体植物凝集素,具有高度选择性地结合α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基的能力,可用于识别和结合多种糖缀合物或糖蛋白。
CY3是一种荧光性能优良的花青类染料,其激发与发射波长分别约为550 nm和570 nm,具有较高的量子产率和光稳定性,适合用于荧光显微镜、流式细胞仪和共聚焦成像系统。为了实现CY3与ConA的有效标记,通常采用NHS酯活化的CY3染料与ConA分子中的游离赖氨酸残基发生共价酰胺化反应。
Cy3-ConA的制备过程包括以下几个主要步骤。首先,将纯化后的ConA溶解于适宜的缓冲体系中(如0.1 M碳酸氢钠缓冲液,pH 8.3),以保证赖氨酸侧链氨基处于游离态,有利于后续反应。接着,向ConA溶液中缓慢加入CY3-NHS酯溶液(通常以DMSO为溶剂),在避光条件下于室温反应1–2小时。反应完成后,通过凝胶过滤柱(如Sephadex G-25)或透析去除未反应的游离染料,获得CY3标记的ConA蛋白。
在纯化过程中,可根据蛋白与染料的摩尔比控制标记密度,避免因过度标记造成ConA生物活性的下降。终产物可用紫外-可见分光光度法测定其蛋白浓度与标记率,典型的标记度控制在每个ConA分子约结合1~3个CY3分子,以保持良好的结合能力与荧光性能。
制备后的Cy3-ConA可长期低温避光保存,一般在含甘油的缓冲液中分装保存于–20°C条件下。该探针可在细胞糖链研究、荧光标记纳米材料、糖蛋白定量分析等实验中提供双重功能,一方面识别特定糖结构,另一方面通过荧光信号实现可视化追踪。整体来看,Cy3-ConA在糖生物学与生物分析等研究方向中具有重要的应用价值。
产品名称:CY3标记的刀豆蛋白A CY3-Concanavalin-A
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液

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