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CY3标记的恩夫韦肽 CY3-Enfuvirtide的溶解度

时间:2025-07-30 10:31:59       浏览:84
CY3标记的恩夫韦肽 CY3-Enfuvirtide的溶解度
CY3标记的刀豆蛋白A(CY3-Concanavalin A,简称CY3-ConA)是一种将刀豆球蛋白A与CY3荧光染料通过共价偶联方式结合而成的荧光探针。Concanavalin A(ConA)是一种来源于豆科植物刀豆的植物凝集素,能够专一性识别α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基,常用于研究糖类结构、细胞膜糖蛋白以及多糖复合物的分布。通过引入CY3染料,可使该糖结合蛋白具备荧光信号,从而实现糖类分子识别过程的可视化分析。
CY3是一类具有良好荧光性能的花青类染料,激发波长约为550 nm,发射波长约为570 nm,常以N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS酯)的形式用于标记含有伯胺的生物分子。在CY3-ConA的制备中,常采用NHS酯活化的CY3染料与ConA分子中的赖氨酸残基发生共价反应,从而完成荧光标记。
合成CY3-ConA的步骤如下:
蛋白溶液准备:将纯化的ConA蛋白溶解于碳酸氢钠缓冲液(0.1 M,pH 8.3),浓度一般为1–5 mg/mL。该缓冲液可维持赖氨酸侧链氨基处于非质子化状态,有利于与NHS酯反应。
CY3染料活化与溶解:将CY3-NHS酯溶解于无水DMSO或DMF中,配制成1–10 mM的储备液。染料应现用现配,并避免暴露在光照下,以减少光降解。
共价偶联反应:在避光条件下,将CY3-NHS溶液缓慢加入ConA溶液中,轻轻混匀,使反应物比例控制在适当范围(如每mg蛋白加入5–20倍摩尔量的CY3)。反应通常在室温避光下进行1–2小时。
去除未结合染料:反应结束后,采用凝胶过滤柱(如Sephadex G-25)或透析的方法将未反应的游离CY3染料去除,收集蛋白组分,得到纯化后的CY3-ConA。
表征与储存:使用紫外-可见光分光光度计测定蛋白浓度(280 nm)与染料浓度(550 nm),计算标记度。产物可溶于PBS或其他适宜缓冲液中,并在含甘油的溶液中避光保存于–20°C以延长稳定性。
CY3-ConA在糖类识别、生物成像、细胞表面糖链分析等实验中具有应用。通过上述合成步骤,可获得具有荧光功能且保持糖识别活性的复合探针,适用于多种荧光检测平台。
产品名称:CY3标记的恩夫韦肽 CY3-Enfuvirtide
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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