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Cy3-labeled载脂蛋白A1,CY3标记的载脂蛋白A1的合成路线

时间:2025-07-31 10:55:23       浏览:25
Cy3-labeled载脂蛋白A1,CY3标记的载脂蛋白A1的合成路线
载脂蛋白A1(Apolipoprotein A1,ApoA1)是血浆中主要的高密度脂蛋白成分,分子量约为28 kDa,由243个氨基酸残基组成。通过CY3荧光染料对ApoA1的标记,便于研究其结构、动力学及与脂质的相互作用。
合成CY3-labeled ApoA1的路线主要包含蛋白的溶解、标记反应及纯化步骤。首先,纯化的ApoA1蛋白溶解于适宜缓冲液(如PBS或碳酸盐缓冲液,pH 7.4-8.5),浓度一般控制在1-5 mg/mL,以保证蛋白处于稳定溶解状态。
荧光染料CY3以其NHS酯形式制备,溶于无水有机溶剂(如DMSO),以避免水解。将CY3-NHS酯缓慢滴加至蛋白溶液中,摩尔比一般控制在1:10至1:50(染料:蛋白),并保持反应体系轻柔混合。反应在4°C至室温下进行1至3小时,避免蛋白质变性及非特异性反应。
标记过程中,CY3的NHS酯活性基团与ApoA1分子表面的赖氨酸侧链氨基反应,形成稳定的酰胺键。此过程需保持缓冲体系的pH适中,确保氨基亲核性,同时保护蛋白的三级结构。
反应结束后,通过透析、凝胶过滤或超滤技术去除未结合的游离染料,确保标记产物的纯度。纯化后的CY3-ApoA1在紫外-可见光谱仪中表现出特征性的吸收峰和荧光峰,证明标记成功。
该标记蛋白能维持其构象和功能,适合用于脂蛋白复合物组装、脂质结合和受体相互作用的研究。合成路线简单且适应性强,便于大规模制备与后续多样化应用。
产品名称:Cy3-labeled载脂蛋白A1
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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