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Cy3-labeled载脂蛋白B,ApoB,CY3标记的载脂蛋白B的合成步骤
载脂蛋白B(Apolipoprotein B,简称ApoB)是一种大型脂蛋白分子,分子量约为550 kDa,结构复杂,富含赖氨酸和精氨酸残基。将荧光染料CY3标记于ApoB分子上,有助于研究其分布、动力学及脂质结合特性。
合成Cy3-labeled ApoB的步骤通常从蛋白的溶解开始。纯化的ApoB首先溶解于适当的缓冲液中,如碳酸盐缓冲液(pH 8.0-8.5)或PBS(pH 7.4),浓度控制在0.5-2 mg/mL,以确保蛋白处于稳定状态。
荧光染料CY3以NHS酯形式储存,需溶于无水有机溶剂(如DMSO)以保持活性。将CY3-NHS溶液缓慢滴加至ApoB溶液中,保持缓慢搅拌,反应温度一般控制在室温至4°C,避免蛋白变性。染料与蛋白的摩尔比通常根据需求设定,常见范围为5:1至20:1。
反应时间通常为1至3小时,pH条件适宜可促进NHS酯与蛋白赖氨酸侧链氨基的酰胺键形成,确保标记稳定性。反应完成后,采用透析、凝胶过滤或超滤方法去除游离的未结合染料。
纯化后的Cy3-ApoB通过紫外-可见光光谱和荧光光谱检测确认标记成功,同时可进行SDS-PAGE等技术验证蛋白完整性。标记产物在保持ApoB结构和功能的基础上,表现出稳定的荧光性质,适合于细胞摄取、脂质代谢及蛋白质互作研究。
产品名称:Cy3-labeled载脂蛋白B
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
载脂蛋白B(Apolipoprotein B,简称ApoB)是一种大型脂蛋白分子,分子量约为550 kDa,结构复杂,富含赖氨酸和精氨酸残基。将荧光染料CY3标记于ApoB分子上,有助于研究其分布、动力学及脂质结合特性。
合成Cy3-labeled ApoB的步骤通常从蛋白的溶解开始。纯化的ApoB首先溶解于适当的缓冲液中,如碳酸盐缓冲液(pH 8.0-8.5)或PBS(pH 7.4),浓度控制在0.5-2 mg/mL,以确保蛋白处于稳定状态。
荧光染料CY3以NHS酯形式储存,需溶于无水有机溶剂(如DMSO)以保持活性。将CY3-NHS溶液缓慢滴加至ApoB溶液中,保持缓慢搅拌,反应温度一般控制在室温至4°C,避免蛋白变性。染料与蛋白的摩尔比通常根据需求设定,常见范围为5:1至20:1。
反应时间通常为1至3小时,pH条件适宜可促进NHS酯与蛋白赖氨酸侧链氨基的酰胺键形成,确保标记稳定性。反应完成后,采用透析、凝胶过滤或超滤方法去除游离的未结合染料。
纯化后的Cy3-ApoB通过紫外-可见光光谱和荧光光谱检测确认标记成功,同时可进行SDS-PAGE等技术验证蛋白完整性。标记产物在保持ApoB结构和功能的基础上,表现出稳定的荧光性质,适合于细胞摄取、脂质代谢及蛋白质互作研究。
产品名称:Cy3-labeled载脂蛋白B
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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