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CY3-TF,CY3标记的转铁蛋白的化学反应原理

时间:2025-07-31 11:08:38       浏览:33
CY3-TF,CY3标记的转铁蛋白的化学反应原理
CY3标记转铁蛋白的化学反应原理主要依赖于Cy3荧光染料中NHS酯基团的活性。NHS酯作为一种常用的活性酯,能与蛋白质中的游离胺基形成稳定的酰胺键。
转铁蛋白分子表面存在多个赖氨酸残基,含有可作为亲核试剂的氨基。在适宜的缓冲条件下,通常pH 7.5至8.5范围内,赖氨酸氨基保持未质子化状态,具备较强的亲核性,能够攻击NHS酯的碳酰基,推动酰胺键形成。
该反应过程伴随着N-羟基琥珀酰亚胺的离去,形成稳定的共价键,连接Cy3染料与蛋白分子。反应温和,通常在室温或4℃进行,反应时间控制在数小时内,以兼顾反应效率和蛋白质结构稳定性。
该标记过程的关键是避免非特异性反应及蛋白质变性,因而需要优化缓冲液成分、pH值及反应时间。部分反应体系中添加适量的有机溶剂,如DMSO,能够提高Cy3-NHS的溶解度,增强反应效率。
完成反应后,游离的Cy3-NHS酯及副产物通过透析、凝胶过滤等方法去除,获得纯净的Cy3-转铁蛋白标记物。反应后产物在荧光光谱中显示典型的激发与发射峰,证实标记成功。
该共价偶联反应不仅保证标记的牢固性,还确保了转铁蛋白的结构和功能基本保持完整,适合后续的生物化学及细胞学研究。
产品名称:CY3-TF,CY3标记的转铁蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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仅用于科研,不能用于人体。小编axc

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