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Cy3-Transferrin,Cy3-TF,CY3标记的转铁蛋白的合成步骤概述
CY3标记转铁蛋白的合成通常基于Cy3染料的活性酯(如NHS酯)与转铁蛋白表面游离的赖氨酸氨基发生共价反应。首先,将纯化的转铁蛋白溶解于适宜的缓冲液中,pH一般调整至7.5-8.5,以保证赖氨酸氨基的亲核性。
随后,溶解于有机溶剂(如DMSO)中的Cy3-NHS酯被缓慢加入蛋白溶液中,反应体系在室温或低温条件下缓慢搅拌。反应时间多控制在2至6小时,期间保持避光以防止染料光降解。
反应中,Cy3-NHS酯通过亲核攻击赖氨酸氨基形成酰胺键,实现稳定的共价连接。该过程需控制染料与蛋白的摩尔比,避免过度标记造成蛋白构象改变或活性损失。
反应结束后,通过透析、凝胶过滤或超滤方法去除未结合的游离染料及副产物,获得纯净的CY3-转铁蛋白标记产物。纯化过程注重温和条件,防止蛋白变性。
终产物经过吸光度和荧光光谱检测确认标记成功。该标记方法保持转铁蛋白的铁结合能力和受体识别功能,为后续生物学应用提供基础。
产品名称:Cy3-Transferrin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
CY3标记转铁蛋白的合成通常基于Cy3染料的活性酯(如NHS酯)与转铁蛋白表面游离的赖氨酸氨基发生共价反应。首先,将纯化的转铁蛋白溶解于适宜的缓冲液中,pH一般调整至7.5-8.5,以保证赖氨酸氨基的亲核性。
随后,溶解于有机溶剂(如DMSO)中的Cy3-NHS酯被缓慢加入蛋白溶液中,反应体系在室温或低温条件下缓慢搅拌。反应时间多控制在2至6小时,期间保持避光以防止染料光降解。
反应中,Cy3-NHS酯通过亲核攻击赖氨酸氨基形成酰胺键,实现稳定的共价连接。该过程需控制染料与蛋白的摩尔比,避免过度标记造成蛋白构象改变或活性损失。
反应结束后,通过透析、凝胶过滤或超滤方法去除未结合的游离染料及副产物,获得纯净的CY3-转铁蛋白标记产物。纯化过程注重温和条件,防止蛋白变性。
终产物经过吸光度和荧光光谱检测确认标记成功。该标记方法保持转铁蛋白的铁结合能力和受体识别功能,为后续生物学应用提供基础。
产品名称:Cy3-Transferrin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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